[发明专利]以叶片为外植体的玉露离体快繁方法

摘要

本发明的目的是为克服传统玉露繁殖方法存在的繁殖速度慢，性状不稳定，成活率低等缺点；也为了克服前人玉露组织培养试验中丛生芽诱导分化率低，再生周期长，不适合工厂化生产等缺点。发明提供一种玉露的离体快速繁殖方法，使玉露在相对短的时间内产生大量遗传背景稳定，株型一致的再生植株。可以在不影响母株正常发育及繁殖的情况下使玉露在相对短的时间内大规模繁殖，并且取材不受季节限制，再生周期短，愈伤组织诱导率高，丛生芽分化率高，植株移栽后生长状态良好。非常适用于玉露稀缺品种的快速繁殖，平均单株再生苗的成本极低，非常适合工厂化生产。

主权项

以叶片为外植体的玉露离体快繁方法，其特征在于包括下列步骤：1)外植体接种及愈伤组织诱导：取玉露植株的幼嫩叶片，放入无菌超净台中，用75％(体积/体积)酒精浸泡30～60s，用无菌水冲洗2～3次后，迅速倒入1.5～3％(质量/体积)次氯酸钠溶液中浸泡8～10min，倾去次氯酸钠溶液，再用无菌水冲洗4～5次，将处理好的玉露叶片，横切成1cm左右小段；接种在MS固体培养基上，待长出黄绿色粒状愈伤时即可诱导分化；2)丛生芽的诱导：将愈伤转接到诱导分化培养基；光照强度为1500～2000Lux，光照时间每天12～14小时，培养温度在24℃～28℃，40～50天继代一次，该愈伤分化能力可持续一年以上；从一块愈伤经过反复继代可分化出800株左右的再生苗；3)壮苗培养：再生苗转到1/2MS+20％天然椰汁(体积/体积)，pH值为5.6～6.0的壮苗培养基上，光照强度1500～2000Lux，光照时间每天12～14小时，培养温度在24℃～28℃；4)再生植株移栽。