[发明专利]一种甘草皂苷脂质体免疫佐剂及其制备方法

摘要

本发明属于兽用疫苗佐剂技术领域，尤其涉及一种甘草皂苷脂质体免疫佐剂及其制备方法，主要包含以下几种原料成分：大豆卵磷脂10‑50份、胆固醇3‑17份、丁基化羟基甲苯1‑5份、硬脂胺0.1‑3份、磷脂酸0.1‑2份、甘草皂苷0.5‑2份、胞壁酰三肽0.5‑2份，本发明将中药甘草提取物甘草皂苷和肽类佐剂胞壁酰三肽相结合，通过注入法和冻融法制备成具有免疫增强作用的脂质体免疫佐剂，甘草皂苷脂质体佐剂应用于疫苗安全性好、副作用小，因具有双层膜结构，可提高抗原的稳定性，同时将充分发挥甘草皂苷和胞壁酰三肽的免疫调节作用及脂质体的载体效应，达到持久、高效的免疫促进作用，增强疫苗的免疫效果。

主权项

1.一种甘草皂苷脂质体免疫佐剂，其特征在于：包括以下重量份数的原料组成：大豆卵磷脂30份、胆固醇10份、丁基化羟基甲苯2.4份、硬脂胺1.2份、磷脂酸1.2份、甘草皂苷1份、胞壁酰三肽1份；所述甘草皂苷脂质体免疫佐剂的制备方法，具有以下步骤：步骤1）将大豆卵磷脂、胆固醇按3:1的比例混合均匀后得到混合液1，再将丁基化羟基甲苯、硬脂胺、磷脂酸按2:1:1的比例混合均匀得到混合液2，将混合液2倒入混合液1中得到混合液3；步骤2）将步骤1）得到的混合液3溶于有机溶剂乙醚中，得到混合液4，用注射器将混合液4缓慢注入加热至50‑55℃的PBS内，得到混合液5；步骤3）采用恒温磁力搅拌器不断搅拌混合液5，直至有机溶剂乙醚挥发干净，得到大的多孔脂质体；步骤4）将步骤3）所得的多孔脂质体的混悬液过高压均质机3次，得到大单室脂质体；步骤5）将步骤4）得到的大单室脂质体与甘草皂苷、胞壁酰三肽按4:1:1的比例混合，混合均匀后得到药液1；步骤6）将步骤5）得到的药液1快速冷冻，形成冰晶的片层和破碎的膜同时存在的状态，在室温状态下缓慢融化，连续冻融3次，使脂膜之间不断重新融合，伴随着甘草皂苷和胞壁酰三肽在脂质体间的渗透和包被，形成均一的小单室脂质体，即为所述的甘草皂苷脂质体。