[发明专利]环介导等温扩增技术检测铜绿假单胞菌的引物和试剂盒

摘要

本发明公开了一组环介导等温扩增技术检测铜绿假单胞菌的引物和铜绿假单胞菌基因快速诊断试剂盒。现有技术中国专利CN 102134601 A公开了一种种铜绿假单胞菌的环介导等温扩增检测引物、检测方法和检测试剂盒，该发明针对铜绿假单胞菌的ecfX基因，设计和筛选了一套特异性检测引物组以及含有该检测引物组的检测试剂盒和利用该检测试剂盒通过LAMP的检测。与现有技术相比，本发明在其基础上，也是利用ecfX基因设计了一组新的引物。通过两组引物的对比实验，本发明的引物具有更好的灵敏度高。

主权项

环介导等温扩增技术检测铜绿假单胞菌的引物，其特征在于，引物序列如下：外侧引物对F3和B3：上游引物F3：GCTCGTACGGAGATACAGCC；下游引物B3：TGTTCACCGTTTGTATTGGCG；内侧引物对FIB和BIP：上游引物FIP：GTCGAATCCCTTTAGGACGGAGACCCTTTCGAACGCGGGGAATGGCC；下游引物BIP:AAGTTCACACTGTGGAGGAGCAACCCAATAGACCCGAGCCATGTTTCC一种铜绿假单胞菌基因快速诊断试剂盒，其特征在于，包括BstDNA聚合酶、反应液、样品预处理液、显色液和阳性对照液组成；反应液：每1L反应液中含有1.6～2mmol dNTP、20～25mmol Tris‑HCl、10～12.5mmol氯化钾、10～12.5mmol硫酸铵、8～10mmol硫酸镁、1～1.25ml TritonX‑100、0.8～1mol甜菜碱、内引物FIP/BIP各1.6～2mol和外引物F3/B3各0.2～0.25mol；每1L样品预处理液中含有10～20mmol pH 8.0的Tris‑HCl、1～2mmol EDTA和10～12ml Triton X‑100；显色剂：为10％的荧光染料SYBR GREEN I。