[发明专利]基于甲病毒复制子鸡球虫的DNA疫苗及制备方法在审
| 申请号： | 201710442590.7 | 申请日： | 2017-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN107460205A | 公开（公告）日： | 2017-12-12 |
| 发明（设计）人： | 李建华;祝涛;张西臣;朱刚;宫鹏涛;杜义明;杨举 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;A61K39/012;A61P33/02 |
| 代理公司： | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司22100 | 代理人： | 陈宏伟 |
| 地址： | 130011 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种基于甲病毒复制子鸡球虫的DNA疫苗，为一种新型的鸡球虫DNA疫苗，可用于鸡球虫病的预防，基于甲病毒复制子为基础的新型DNA疫苗不仅能高效的表达目的基因，而且甲病毒复制子不进入细胞核，仅在胞浆中目的蛋白表达之后便发生凋亡而被机体清理，不会结合到宿主细胞的基因组上，其安全性好。这类新型的DNA疫苗制备简单、易于生产、成本低，保存和运输比较容易，适用于广泛的使用。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 病毒 复制 子鸡 dna 疫苗 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种重组质粒pSMARAT2b‑Rhomboid3的制备方法，包括以下步骤：提取柔嫩艾美耳球虫的总RNA，提取柔嫩艾美耳球虫的总RNA并反转录为cDNA，通过PCR扩增Rhomboid3基因，然后连接pMD‑18T、pSMARAT2b并在DH5α克隆，且通过测序及酶切鉴定，大小为774bp；接着将重组质粒pSMARAT2b‑Rhomboid3通过LipofectamineTM2000转入293细胞表达，并对表达产物进行Western blot分析鉴定。
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