[发明专利]一种改进的二代测序用随机标签接头制作方法有效
| 申请号： | 201710443643.7 | 申请日： | 2017-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN107190067B | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 金保雷;李旭超;施伟杰;葛会娟;阮力;郑立谋 | 申请（专利权）人： | 厦门艾德生物医药科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12N15/11;C12N15/10 |
| 代理公司： | 35204 厦门市首创君合专利事务所有限公司 | 代理人： | 张松亭;游学明 |
| 地址： | 361000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种改进的二代测序用随机标签接头制作方法，其特征在于：在接头制作的接头引物P7上引入能够阻止聚合酶延伸的Spacer修饰；在接头延伸步骤，聚合酶遇到P7模板链的Spacer位点后即终止延伸，留下一段5’突出末端；接下来的酶切步骤，内切酶去除包括Spacer位点在内的突出末端，产生完整的接头；而酶切不充分残留的未被酶切接头，仍然保留较长5’突出末端。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 改进 二代 测序用 随机 标签 接头 制作方法 | ||
【主权项】：
1.一种改进的二代测序用随机标签接头制作方法，其特征在于：在接头制作的接头引物P7上引入能够阻止聚合酶延伸的Spacer修饰；在接头延伸步骤，DNA聚合酶遇到P7模板链的Spacer位点后即终止延伸，留下一段5’突出末端；接下来的酶切步骤，内切酶去除包括Spacer位点在内的突出末端，产生完整的接头；而酶切不充分残留的未被酶切接头，仍然保留5’突出末端，/n其中，所述的P7包括接头引物P7-A、P7-B和P7-C，接头引物P7-A为FFFFF-Spacer-EEEEEJJJJJNNNNNNNNNNNN连接在SEQ ID NO：2的5’端所得；接头引物P7-B为FFFFF-Spacer-EEEEEKKKKKNNNNNNNNNNNN连接在SEQ ID NO：2的5’端所得；接头引物P7-C为FFFFF-Spacer-EEEEELLLLLNNNNNNNNNNNN连接在SEQ ID NO：2的5’端所得。/n
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