[发明专利]一种提高甜叶菊REB‑D得率的方法

摘要

本发明公开了一种提高甜叶菊REB‑D得率的方法，主要是通过甜叶菊的栽培及甜菊糖苷提取方法这两个方面来实现的，其中在甜叶菊的栽培中，需要在甜叶菊收割前2个月，喷施包括轻稀土元素0.01‑0.05份、光合菌0.1‑0.2份、盐5‑8份、螯合钾15‑25份以重量份计的调节剂来刺激甜叶菊叶面，每5‑7天喷施一次，每次喷施的量以叶面湿润为准。与现有技术相比，本发明使莱鲍迪苷D的含量在以往的基础上提高2‑5倍；2、采用两种酶解、加热煮沸，加快了甜菊糖苷从甜叶菊叶片中的释放速率，也免去了溶剂乙醇的使用，加快了甜菊糖苷的提取速率。

主权项

一种提高甜叶菊REB‑D得率的方法，其特征在于，是通过以下几个方面来实现的：（1）甜叶菊的栽培：在甜叶菊收割前2个月，喷施包括轻稀土元素0.01‑0.05份、光合菌0.1‑0.2份、盐5‑8份、螯合钾15‑25份以重量份计的调节剂来刺激甜叶菊叶面，每5‑7天喷施一次，每次喷施的量以叶面湿润为准；（2）甜菊糖苷的提取：a、叶片粉碎至200‑300目；b、加适量水混合后，加酶水解，所用酶为纤维素酶及中性蛋白酶两种酶，其中纤维素酶的添加量为底物的2%‑3%，适宜温度为40℃，pH为4.5‑6.5，活力为10万单位每克，作用时间1‑1.5h；中性蛋白酶的添加量为0.05%‑0.25%，适宜温度为35‑55℃，pH值为6‑6.8，活力为10万单位每克，作用时间为0.5‑0.8h；然后加热煮沸，维持煮沸状态1‑2h，过滤得提取液、滤渣，其中滤渣重复加热煮沸1‑3次，收集全部的滤液，得总提取液；c、将质量分数为20‑30%的三氯化铁溶液与总提取液按照5‑10:1‑3:50‑80的体积比混合均匀，并用氢氧化钙调节pH值至7‑7.5，并加热至40‑50℃，保温10‑25min，然后冷却至室温，得混合液；d、用经过预处理的HPD‑392大孔吸附树脂纯化步骤c得到的混合液，树脂吸附时的流速为3‑5BV/h，吸附饱和后用乙醇溶液洗脱，洗脱的速度为4‑6BV/h，得洗脱液；e、采用微孔膜再次过滤步骤d得到的洗脱液，然后采用药用脱色用氧化铝进行脱色，流速为22.0‑25.0mL/min，同时加温至40‑45℃，最后经过滤、浓缩、干燥得到甜菊糖苷。