[发明专利]一种同一体系中同时对两个蛋白进行特异性标记或修饰的方法

摘要

本发明涉及一种同一体系中同时对两个蛋白进行特异性标记或修饰的方法，包括利用S1型和S11型两个新型intein具有极短的N‑intein或C‑intein小片段的优势，通过人工合成该intein小片段，并在合成的过程中引入拟修饰基团，后续通过反式剪接将拟修饰基团标记于目标蛋白的N端或C端。本发明操作简单，且标记效率高，在蛋白质标记领域具有重要的应用价值。

主权项

一种同一体系中同时对两个蛋白进行特异性标记或修饰的方法，包括：(1)将目标蛋白1与S1型intein的C‑intein片段相连构建融合蛋白1；将目标蛋白2与S11型intein的N‑intein片段相连构建融合蛋白2；(2)化学合成S1型intein的N‑intein片段同时在其N端加入linker序列GGG，在linker的首个氨基酸G引入特异性标记1或修饰1，得到合成片段1；化学合成S11型intein的C‑intein片段同时在其C端加入linker序列CFNK，在linker的最末氨基酸K引入特异性标记2或修饰2，得到合成片段2；(3)将融合蛋白1、合成片段1、融合蛋白2及合成片段2混合于同一体系中；通过S1型intein的反式剪接，融合蛋白1的N端被标记上特异性标记1或修饰1，通过S11型intein的反式剪接，融合蛋白2的C端被标记上特异性标记2或修饰2。