[发明专利]一种两相法快速筛选反硝化聚磷菌的方法有效

专利信息
申请号: 201710452146.3 申请日: 2017-06-15
公开(公告)号: CN107312715B 公开(公告)日: 2020-06-19
发明(设计)人: 王继勇;江英杰;陈加立;肖挺 申请(专利权)人: 武汉理工大学
主分类号: C12N1/02 分类号: C12N1/02;C12N1/20
代理公司: 湖北武汉永嘉专利代理有限公司 42102 代理人: 崔友明;闭钊
地址: 430070 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明公开了一种两相法快速筛选反硝化聚磷菌的方法,该方法通过模拟反硝化聚磷菌的生存环境,设计了厌氧‑缺氧两相交替条件,分别在厌氧相采用含外加碳源无磷培养基和缺氧相采用无外加碳源含磷培养基进行筛选,接着将驯化培养液稀释后涂布筛选出单株菌,然后将筛选出的单株菌分别点种在含5‑溴‑4‑氯‑3‑吲哚基磷酸酯高、低磷固体培养基上,挑选在上述两种培养基中同时出现蓝斑的菌株,将其在BTB反硝化培养基中划线培养,挑选使培养基变蓝的菌株。本发明具有选择性强、工作量小、能大大缩短筛选周期等优点。
搜索关键词: 一种 两相 快速 筛选 硝化 聚磷菌 方法
【主权项】:
一种两相法快速筛选反硝化聚磷菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:(a)首先将活性污泥与水混合后震荡培养,离心后弃去上清液得混合物;(b)按比例向混合物中加入含外加碳源无磷培养基,进行厌氧培养;(c)将步骤(b)所得厌氧培养液离心后弃去上清液,按比例加入无外加碳源含磷培养基,进行缺氧培养;(d)将步骤(c)所得缺氧培养液离心后弃去上清液,按照步骤(b)和(c)的方法交替进行厌氧培养和缺氧培养多次;(e)依次采用5‑溴‑4‑氯‑3‑吲哚基磷酸酯固体培养基、BTB反硝化固体培养基筛选出目标菌株。
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