[发明专利]一种含黑色素细胞的体外皮肤测试模型的构建方法有效
申请号: | 201710460505.X | 申请日: | 2017-06-18 |
公开(公告)号: | CN107287151B | 公开(公告)日: | 2023-06-16 |
发明(设计)人: | 车景敏;卢永波 | 申请(专利权)人: | 广东博溪生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 北京派特恩知识产权代理有限公司 11270 | 代理人: | 胡亮;张颖玲 |
地址: | 523808 广东省东莞市松山湖高新技术产业开发*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: |
本发明公开了一种含黑色素细胞的体外皮肤测试模型的构建方法,使用人表皮角质形成细胞的培养基作为基础液,分别配置培养基a和培养基b;将角质形成细胞与黑素细胞分别采用培养基a制成细胞悬液,分别接种到均匀接种到Transwell小室中,再加入培养基a在37℃,5%CO |
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搜索关键词: | 一种 黑色素 细胞 体外 皮肤 测试 模型 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种含黑色素细胞的体外皮肤测试模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:配制培养基使用人表皮角质形成细胞的培养基作为基础液,分别配置培养基a和培养基b;培养基a:在基础液中添加对黑色素细胞促进黑色素生成的生长因子,制成基础培养基a;培养基b:以培养基a为基础液,添加促进表皮复层化的氯化钙,制成基础培养基b;步骤二:表皮层的构建将角质形成细胞与黑素细胞分别采用培养基a制成细胞悬液,分别接种到均匀接种到Transwell小室中,再加入培养基a在37℃,5%CO2培养箱中进行浸没式培养1~5天,形成含黑色素细胞的表皮层结构;步骤三、含黑色素的皮肤测试模型表皮层后期培养将步骤三中含黑色素细胞的表皮层结构置于培养器皿内的培养支架表面,加入培养基b进行气液面培养,使液面与表皮层结构的表面平齐,置于37℃、5%CO2培养箱中培养5~15天,得到所述含黑色素的皮肤测试模型。
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