[发明专利]高效合成融合基因的方法及其应用在审
申请号: | 201710476786.8 | 申请日: | 2017-06-21 |
公开(公告)号: | CN107287190A | 公开(公告)日: | 2017-10-24 |
发明(设计)人: | 谢昌平 | 申请(专利权)人: | 上海恩即斯生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12N15/66 |
代理公司: | 北京酷爱智慧知识产权代理有限公司11514 | 代理人: | 孟凡臣 |
地址: | 201203 上海市徐汇区自由贸易试*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种高效合成融合基因的方法及其应用,合成融合基因的方法包括如下步骤分析待合成融合的基因序列,确定适合进行退火的区域;根据适合进行退火的区域而选择合适长度的片段,进行各个片段的引物的设计与合成;混合合成的各个片段的引物,然后进行重叠PCR,将各个片段的引物拼接成,得到拼接产物,即为合成融合得到的基因。本发明提供的高效合成融合基因的方法,可以提高重叠PCR反应的效率和成功率,一次成功率高达100%,远远高于现有技术中的重叠PCR的一次成功率70%~80%,免去了需要多次尝试PCR条件、改变反应体系中离子强度和添加剂、反应温度等繁琐的优化步骤,大大降低了成本。 | ||
搜索关键词: | 高效 合成 融合 基因 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种合成融合基因的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1:分析待合成融合的基因序列,确定适合进行退火的区域;S2:在所述适合进行退火的区域中选择合适长度的片段,进行各个片段的引物的设计与合成;S3:混合合成的各个片段的引物,然后进行重叠PCR,将各个片段的引物拼接成,得到拼接产物。
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