[发明专利]用于大豆体细胞胚状体持续增殖和继代保存的培养方法

摘要

本发明属植物生物技术领域，涉及一种用于大豆体细胞胚状体持续增殖和继代保存的培养方法。利用该培养方法继代保存的大豆体细胞胚状体可以持续增殖3年以上仍具有极强的再生能力。本发明提供的大豆体细胞胚状体持续增殖培养基包含如下成分1×改良MS盐，1×B5有机，天门冬酰胺670‑750mg/L，2，4‑D 10‑20mg/L，蔗糖10‑30g/L，植物凝胶3‑5g/L，PH 5.7‑6.2。培养条件为低光照强度(400‑1000Lux)，光周期16/8小时(光/暗)，培养温度25±1℃，每2‑3周继代一次。继代保存3年以上的大豆体细胞胚状体可以正常萌发并再生为完整的植株。本发明内容有效解决了大豆组织培养中外植体诱导与再生频率易受季节和环境影响的问题，为大豆组织培养和转基因研究持续提供高分生能力且同步化的体细胞胚状体。

主权项

一种用于大豆体细胞胚状体持续增殖和继代保存的培养方法，包括如下步骤：(1)取开花后15‑20天的大豆未成熟子叶接种于诱导培养基，于黑暗条件下培养6‑8周后，在外植体周围诱导产生成簇、黄绿色的球形体细胞胚状体；(2)将球形胚状体转接至增殖培养基中培养，培养条件为400‑1000Lux低光照强度，光周期为16小时光/8小时暗交替，培养温度25±1℃，每2‑3周换一次增殖培养基，连续继代培养3年以上。