[发明专利]基于金属同位素标记流式结合ICP‑MS的单细胞蛋白检测方法

摘要

本发明公开了一种基于金属同位素标记流式结合ICP‑MS的单细胞蛋白检测方法，属于流式单细胞蛋白检测技术领域。本发明采用金属元素标签标记抗体或染料，从根本上解决了荧光串色的问题，利用质谱原理对单细胞进行多参数定量检测，实现了几十个参数的同时测量，应用于单细胞蛋白组学分析。将质谱技术与流式细胞技术两种实验平台的融合，既继承了传统流式细胞仪的高速分析的特点，又具有质谱检测的高分辨能力。本发明中可使用的金属标签元素种类丰富，在细胞中的含量极低，同时金属原素通过多聚螯合物实现与抗体的共价耦联，这种多聚螯合物与细胞组分的非特异性结合能力极低，所以信号的背景极低。

主权项

基于金属同位素标记流式结合ICP‑MS的单细胞蛋白检测方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)样品标记：采用金属元素标记的特异抗体或染料标记或识别细胞表面和内部的信号分子，作为靶标表达水平的报告因子；(2)雾化处理：将标记后的样品溶液进行雾化处理，去除其中的水分；(3)plasma离子化：单细胞雾化悬滴进入plasma后被气化、原子化、离子化，形成离子云；(4)去除未离子化物质及光子：利用偏转电场及加速电场的结合去除离子云流中存在的未离子化的物质及光子；(5)ICP‑MS检测：用ICP‑MS观察单个细胞的原子质量谱，将原子质量谱的数据转换为细胞表面和内部的信号分子数据，并通过专业分析软件对获得的数据进行分析，从而实现对细胞表型和信号网络的精细观察。