[发明专利]一种杏梅组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明涉及一种杏梅组织培养快速繁殖方法，包括：以当年生杏梅种子为外植体，经消毒、冷藏、启动培养后，将无菌苗子叶和/或嫩茎接种在分化培养基上，培养3‑4周；获得不定芽后，将不定芽转移至抽茎培养基上，继续培养2‑3周；待丛生苗长至3‑4cm长时，将丛生苗转接入生根培养基上，培养2‑3周；然后将生根苗移栽、罩炼苗后，正常培养。本发明不定芽诱导数量达10.6，丛生苗茎高达3.56cm，丛生苗增值系数达5.5，生根率达95％。本发明实现了杏梅组培快繁，为梅花遗传转化及分子育种提供了技术支持。

主权项

1.一种杏梅组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括：以当年生杏梅种子为外植体，经消毒、冷藏、启动培养后，将无菌苗子叶和/或嫩茎接种在分化培养基上，培养3‑4周；获得不定芽后，将不定芽转移至抽茎培养基上，继续培养2‑3周；待丛生苗长至3‑4cm长时，将丛生苗转接入生根培养基上，培养2‑3周；然后将生根苗移栽、炼苗后，正常培养；种子冷藏处理方法包括：将消毒后的种子转接入冷藏培养基中，一个组培容器中放置6‑7枚，种子与种子之间间隔1‑2cm，并用封口膜封口；将组培容器放置于4℃冰箱黑暗处理培养3‑4周；启动培养方法包括：将冷藏处理后的种子转移至新鲜的启动培养基中，在组织培养室中培养2‑3周，直到种子萌发；培养环境如下：温度23±2℃，16h光照/8h黑暗，光照强度2500lux‑3000lux；所用冷藏培养基为：1/2 MS培养基+蔗糖10‑20g/L+琼脂适量，pH值5.8‑6.0；所用启动培养基为：MS培养基+蔗糖20‑25g/L+6‑BA 0.10‑0.30mg/L+NAA 0.05‑0.25mg/L+琼脂适量，pH值5.8‑6.0；所述分化培养基为：QL培养基+蔗糖20‑30g/L+6‑BA 0.25‑0.50mg/L+NAA 0.05‑0.10mg/L+IBA 0.05‑0.10mg/L+琼脂适量，pH值5.8‑6.0；所述抽茎培养基为：QL培养基+蔗糖20‑25g/L+6‑BA 0.10‑0.20mg/L+NAA 0.05‑0.10mg/L+琼脂适量，pH值5.8‑6.0；所述生根培养基为：1/2MS培养基+蔗糖20‑25g/L+IBA 0.15‑0.30mg/L+琼脂适量，pH值5.8‑6.0。