[发明专利]一种鸡干扰素-α的制备方法在审
申请号: | 201710483238.8 | 申请日: | 2017-06-19 |
公开(公告)号: | CN109134641A | 公开(公告)日: | 2019-01-04 |
发明(设计)人: | 叶楠;吴燕;龚岳斌 | 申请(专利权)人: | 杭州俊丰生物工程有限公司 |
主分类号: | C07K14/56 | 分类号: | C07K14/56;C12N15/70;C07K1/22;C07K1/18 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 310023 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及兽用生物制品领域,尤其涉及一种鸡干扰素α的制备方法。本发明公开了一种鸡干扰素α的制备方法。本发明的制备方法利用了优化基因序列,表达量高于现有基因,通过鸡干扰素‑α基因的获得,表达载体的构建及转化大肠杆菌工程菌,筛选、培养、诱导表达,表达菌体经收集、破菌及包含体的洗涤、裂解和复性,再采用层析技术纯化得到鸡干扰素‑α。本发明的方法对鸡干扰素α的生产具有重大价值。 | ||
搜索关键词: | 制备 干扰素- α 鸡干扰素 种鸡 大肠杆菌工程菌 层析技术纯化 兽用生物制品 表达载体 优化基因 诱导表达 表达量 复性 构建 菌体 裂解 破菌 洗涤 筛选 基因 转化 生产 | ||
【主权项】:
1.一种鸡干扰素‑α的制备方法,其特征在于:(1)鸡干扰素‑α基因的获得;(2)表达载体的构建及转化大肠杆菌工程菌:将鸡干扰素‑α基因序列插入到表达载体质粒的酶切位点,然后转化大肠杆菌宿主菌;(3)阳性克隆的筛选、培养、诱导表达:筛选出阳性克隆在培养基上进行培养,经诱导使目标蛋白表达;(4)鸡干扰素‑α的分离、纯化:首先将大肠杆菌菌体收集、破菌,经离心收集包含体,然后进行包含体的洗涤、裂解和复性,再采用层析技术纯化得到鸡干扰素‑α。
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