[发明专利]一种天然甜菜碱的分离纯化方法

摘要

本发明公开一种天然甜菜碱的分离纯化方法，具体步骤如下首先将甜菜叶根或小麦麸皮超声粉碎，加入酶制剂发酵，然后利用移动床吸附分离装置洗脱、反相聚合物色谱填料色谱纯化，在以高效液相色谱分离、冷却结晶获得天然甜菜碱成品；本发明对天然甜菜碱的提取、纯化及结晶步骤进行优化，获得的成品纯度高。

主权项

一种天然甜菜碱的分离纯化方法，其特征在于，具体步骤如下：1)将原料超声粉碎并过40目筛，溶解于水中，调节pH至4.0‑4.5，然后就加入酶制剂，避光密闭搅拌处理3h‑6h；搅拌处理结束前5min加热升温至60℃‑80℃，再离心分离，取沉淀；所述原料为甜菜叶、甜菜根或小麦麸皮中的一种或多种；所述酶制剂为木聚糖酶、果胶酶或蛋白酶中的一种或多种；2)将沉淀加入质量分数为1%的氢氧化钠水溶液中，然后加入占原料质量0.5%的BHA，获得提取液A；3)调节提取液A的pH至3.5，离心取上清液移入移动床吸附分离装置，将获得的洗脱液加热浓缩至固形物质量百分含量为30％，即为浓缩液C；4)利用硅胶柱层析色谱纯化浓缩液C，纯化使用反相聚合物色谱填料，得到洗脱液D，将洗脱液D浓缩固形物质量百分含量为50%，即为过柱原料；5)利用有机溶剂与醇的混合液对过柱原料进行梯度洗脱，得到纯化洗脱液；15℃冷却结晶，晶种加入量为纯化洗脱液质量的O．2～0．5％，养晶时间为6h，溶析剂的滴加速率为0.75m L‑min‑1，搅拌速率为250rpm，即获得天然甜菜碱；所述溶析剂为甲醇与仲丁醇按体积比5：7混合后获得。