[发明专利]一种活细胞线粒体数量染色检测方法

摘要

本发明公开了一种活细胞线粒体数量染色检测方法，包括以下步骤（1）原液配制噻唑蓝溶于100 ml的磷酸缓冲液中，配制成浓度为0.3‑1wt%的溶液，过滤以除去细菌，避光保存；（2）接种细胞用培养液配成单个细胞悬液，以每孔约2000‑10000个细胞接种到96孔板中，每孔体积200‑300μL；（3）培养细胞根据细胞类型设置培养条件，培养2‑8天；（4）染色每孔加入上述噻唑蓝原液20‑30μL，细胞培养箱内继续孵育3‑5h；（5）观察小心吸取孔内培养上清液10‑50μL，加入200‑300μL新鲜的培养液，并于高倍光学显微镜下观察蓝紫色颗粒数量。本发明方法利用MTT进行线粒体染色计数的方法，和现有的多种染色方法互为补充，能够更好的为细胞科学研究工作提供辅助分析方法。

主权项

一种活细胞线粒体数量染色检测方法，包括以下步骤：（1）原液配制：噻唑蓝溶于100 ml的磷酸缓冲液中，配制成浓度为0.3‑1wt%的溶液，过滤以除去细菌，避光保存；（2）接种细胞：用培养液配成单个细胞悬液，以每孔约2000‑10000个细胞接种到96孔板中，每孔体积200‑300μL；（3）培养细胞：根据细胞类型设置培养条件，培养2‑8天；（4）染色：每孔加入上述噻唑蓝原液20‑30μL，细胞培养箱内继续孵育3‑5h；（5）观察：小心吸取孔内培养上清液10‑50μL，加入200‑300μL新鲜的培养液，并于高倍光学显微镜下观察蓝紫色颗粒数量。