[发明专利]一种具备双单链末端PCR产物的获得方法及其检测方法有效

专利信息
申请号: 201710492708.7 申请日: 2017-06-26
公开(公告)号: CN107164366B 公开(公告)日: 2020-09-04
发明(设计)人: 梁兴国;李同 申请(专利权)人: 中国海洋大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12Q1/686
代理公司: 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 代理人: 郝团代
地址: 266000 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明涉及一种具备双单链末端PCR产物的获得方法,包括如下步骤:(1)设计用于扩增目的核酸的正向引物F和反向引物R序列,并在正向引物F和反向引物R序列的5'端分别加上Tag1和Tag2序列,Tag1序列和正向引物F序列之间、Tag2序列和反向引物R序列之间分别用若干胸腺嘧啶隔开,合成引物Tag1‑F和Tag2‑R;(2)用紫外线对引物Tag1‑F和Tag2‑R的水溶液照射至少30min;(3)混合PCR反应体系置于PCR仪中进行反应,得到具备双单链末端的PCR产物。本发明PCR产物的检测,不需要对引物进行额外的修饰,同时还省去了电泳等繁琐的操作步骤,使PCR产物的检测变得方便快捷,可提高检测效率,降低成本,尤其适用于实时检测或偏远地区使用。
搜索关键词: 一种 具备 双单链 末端 pcr 产物 获得 方法 及其 检测
【主权项】:
一种具备双单链末端PCR产物的获得方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)设计用于扩增目的核酸的正向引物F和反向引物R序列,并在正向引物F和反向引物R序列的5'端分别加上Tag1和Tag2序列,Tag1序列和正向引物F之间、Tag2序列和反向引物R之间分别用若干胸腺嘧啶隔开,合成引物Tag1‑F和Tag2‑R;(2)用紫外线对引物溶液Tag1‑F和Tag2‑R照射至少30min;(3)混合PCR反应体系置于PCR仪中进行反应,得到具备双单链末端的PCR产物。
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