[发明专利]一种山苦瓜的组培快繁方法

摘要

本发明涉及种苗繁育技术领域，具体涉及一种山苦瓜的组培快繁方法。本发明采用组织培养的方法，通过不同外植体选取与处理、诱导、增殖、生根等过程，获得优质山苦瓜组培苗。使用本发明方法，可以明显促进植株生长、茁壮、提高继代次数，缓解玻璃化、黄化等问题，促进山苦瓜的开发、利用，满足其大规模生产和新优品种快速推广的需求。

主权项

1.一种山苦瓜的组培快繁方法，其特征在于，包括以下几个步骤：1)外植体处理山苦瓜的外植体选取主要以带腋芽的茎段为主，带腋芽茎段可以由以下两种途径获得：无菌幼苗途径：选取饱满种子消毒，无菌培养后备用；大田实生苗途径：选择大田实生苗消毒后备用；2)腋芽诱导将步骤1)所得的外植体切取3‑5cm大小的茎段，确保每段含有1‑2个腋芽，接入诱导培养基上,每30‑50ml诱导培养基接种1‑2个外植体，5‑7天后即可诱导出腋芽，培养温度28‑30℃；光照强度2000‑3000Lux，连续光照时长10‑12小时/天；其中，改良基本培养基为：硝酸铵1650mg/L，硝酸钾1900mg/L，七水硫酸镁370mg/L，磷酸二氢钾170mg/L，二水氯化钙440mg/L，宝力健0.5‑1.0g/L，蔗糖20‑30g/L，琼脂6.0‑6.3g/L，用蒸馏水按常规方法配制培养基，用1mol/L的NaOH或HCl调节PH到5.8‑6.2；诱导培养基为每升改良基本培养基中加入0.5mg的6‑BA和0.05mg的IBA组成；3)增殖培养将步骤2)所诱导出的腋芽转到增殖培养基上，每50ml培养基转接5个腋芽进行增殖培养，培养温度28‑30℃，光照强度2000‑3000Lux，连续光照时长10‑12小时/天，培养12‑17天，增殖 系数达到4.0‑5.0获得分化苗丛生芽；其中，增殖培养基为每升改良基本培养基添加0.2‑0.5mg的6‑BA和0.02‑0.05mg的IBA组成；增殖系数为增殖后芽数与增殖前芽数的比值；4)生根培养将步骤3)所得的分化苗丛生芽分单株，每株切取大小3‑5cm，转接到生根培养基上进行生根培养，每50ml培养基上转接5株进行培养，培养温度28‑30℃，光照强度2000‑3000Lux，连续光照时长10‑12小时/天，7‑10天后，待生根苗株高至5‑7cm，主根5条以上，健壮有活力，即可进行驯化移栽；其中，生根培养基为每升改良基本培养基添加0.1‑0.2mg的NAA组成。