[发明专利]一种朱蕉组培繁育方法

摘要

本发明公开了一种朱蕉组培繁育方法，包括步骤一培养瓶消毒；步骤二接种材料的选择；步骤三外植体的构建；步骤四培养基的配置；步骤五组培步骤，包括A、丛生芽诱导；B、继代增殖培养；C、壮苗培养；D、生根培养；步骤六瓶苗移栽。本方法适用于规模化、标准化生产；降低生产成本10％以上；移栽成活率达到90％以上。

主权项

一种朱蕉组培繁育方法，其特征在于包括：步骤一：培养瓶消毒首先将培养瓶进行消毒；将培养瓶用0.5％浓度洗洁精溶液浸洗两次，用自来水冲洗6～8次，除去泡沫，用废旧报纸包裹，置于80℃烘箱中烘24h，之后取出，在无菌环境下放于75％酒精中浸泡30s，然后用0.1％升汞溶液浸泡5min，接着用无菌水冲洗5次，备用；步骤二：接种材料的选择在智能温室大棚内，选择生长健壮的朱蕉成熟单株，进行外植体预处理；预处理方法：淋杀菌剂，每天一次，持续20天；步骤三：外植体的构建待上述步骤完成后，采集外植体；剪取带顶芽的茎段或无顶芽的茎段，去除叶片，用自来水冲洗约30min，在75％酒精中浸泡30s，之后转入1g/L的升汞溶液中浸泡5min后取出，用无菌水洗3次，再转入1g/L的升汞溶液中浸泡3min后取出，用无菌水洗6次；在无菌环境下将消毒后的材料切成3～5cm的小段，备用；步骤四：培养基的配置本方法中所用的培养基包括：a、初始培养基；b、继代增殖培养基；c、壮苗培养基；d、生根诱导培养基初始培养基配方为：MS+6‑BA3.0mg/L+NAA0.01mg/L继代增殖培养基配方为：MS+6‑BA3.5mg/L+NAA5mg/L壮苗培养基配方为：3/4MS+6‑BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L生根诱导培养基配方为：MS+IBA0.5mg/L以上培养基中均加入红糖30g/L和卡拉胶4g/L，且pH值在5.8～6.0之间；步骤五：组培步骤A、丛生芽诱导：将步骤四中初始培养基放于步骤一中消毒后的培养瓶中，之后将步骤三中所述消毒后切成3～5cm的小段接种到所述加了初始培养基的培养瓶中，并将培养瓶放置于光照强度为1000lx的组培架上，每天光照时间为8‑10h，持续28～30d，得到大量的丛生芽；其中，放置组培架的组培室温度在25～26℃之间；B、继代增殖培养：切取步骤A中经丛生芽诱导培养的芽作为材料，进行继代增殖培养；将丛生芽切成长1.0～1.5cm、带单个腋芽的茎段，转入放置继代增殖培养基的培养瓶中，将培养瓶放置于光照强度1000lx的组培架上，每天光照时间为8～10h，持续25d，可得到不具根的幼苗；其中，放置组培架的组培室温度在25～26℃之间；C、壮苗培养：将增殖后的不具根的幼苗接种到放置壮苗培养基上的培养瓶上，然后将培养瓶放于光照强度为1500～2000lx的组培架上，每天光照8h，持续30d，得到不具根的小苗；其中，放置组培架的组培室温度为25～27℃之间；D、生根培养：取壮苗培养至2cm以上，4片叶子以上的芽单个切下接种至放置生根培养基的培养瓶中，然后将培养瓶防御光照强度为2000～2500lx的培养架上，每天光照12h，持续15～20d，可得到生根的小苗；待根长至1～3cm时进行移栽；步骤六：瓶苗移栽将生根培养的根长1～3cm的完整苗取出，洗尽根部的培养基，用1000倍的高锰酸钾溶液或多菌灵溶液浸泡30min后移栽至温室大棚的苗床中，并用遮光网覆盖温室大棚；其中，苗床土壤选择泥炭土、椰糠和珍珠岩混合基质；温室大棚温度控制在22～28℃。