[发明专利]一种规模化发酵生产重组人干扰素β1b蛋白的方法有效
| 申请号： | 201710521089.X | 申请日： | 2017-06-30 |
| 公开（公告）号： | CN107099569B | 公开（公告）日： | 2021-05-07 |
| 发明（设计）人： | 杨云凯;马昱;朱鑫硕;韩凝;刘明;张雅博;周玉 | 申请（专利权）人： | 北京生物制品研究所有限责任公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人： | 韩蕾;姚亮 |
| 地址： | 100176 北京市北京经济*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种规模化发酵生产重组人干扰素β1b的方法，该方法包括：在发酵罐中配制2YT培养基，灭菌后降温至35～40℃；接种含有重组人干扰素β1b基因质粒的大肠杆菌工程菌发酵培养，控制发酵温度为35～40℃、转速200～500r/min、通气量200～500L/min、pH5.0～8.0；待培养至菌体密度OD600达到2～8左右后，加入异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)至终浓度0.2～1.5mM、或分批加入乳糖至终浓度2～10g/升进行诱导；诱导后每小时补加原培养基体积1～10％的速率进行流加补料，继续培养2～8h收获菌体。本发明的方法是一种稳定、高效表达重组人干扰素β1b蛋白的规模化发酵方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 规模化 发酵 生产 重组 干扰素 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
一种发酵生产重组人干扰素β1b的方法，该方法包括：在发酵罐中配制2YT培养基，灭菌后降温至35～40℃；接种含有重组人干扰素β1b基因质粒的大肠杆菌工程菌至发酵罐进行发酵培养，控制发酵温度为35～40℃、转速200～500r/min、通气量200～500L/min、pH5.0～8.0；发酵培养过程中监测菌液的菌体密度OD600值；待培养至菌体密度OD600达到2～8左右后，加入异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)至终浓度为0.2～1.5mM、或分批加入乳糖至终浓度为1～10g/升进行诱导；诱导后按照每个小时补加原培养基体积1～10％的速率进行流加补料，继续培养2～8h停止发酵收获菌体。
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