[发明专利]尿液miRNAs生物标志物及其筛选方法和应用

摘要

本发明涉及生物医药领域，公开了尿液miRNAs生物标志物及其在肝癌诊断标志物发现中的应用。其筛选方法所述方法包括如下步骤1)从尿液中提取包括miRNAs在内的总RNA；2)比较健康者和肝癌患者的miRNAs表达谱，找出肝癌患者尿液中异常表达的miRNAs；3)用实时定量RT‑PCR方法，经小样本初筛及扩大样本验证，筛选可用作肝癌标志物的miRNAs；4)ROC曲线进行相关分析。与健康者比较，miR‑6798‑5p在肝癌患者尿液中呈高表达。本发明建立了尿液miRNAs生物标志物的筛选方法，并发现尿液miRNAs可作为肝癌患者的辅助诊断，样本易得、收集简便、无创，具有重要的学术意义和广阔的应用前景。

主权项

尿液miRNAs生物标志物的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：1)采集健康者和肝癌患者的尿液，提取总RNA；2)初筛：检测健康者和肝癌患者临床尿液标本中miRNAs表达，比较健康者和肝癌患者的miRNAs表达谱，找出肝癌患者尿液中异常表达的miRNAs作为候选；3)复筛：采用实时定量RT‑PCR技术，测定尿样中候选miRNAs的含量，分别进行小样本和/或扩大样本筛选，筛选和确定可用作肝癌标志物的miRNAs；4)用ROC曲线法确定步骤3)筛选的肝癌标志物的miRNAs。