[发明专利]一种安全型抗CEA嵌合抗原受体修饰T细胞的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种安全型抗CEA嵌合抗原受体修饰T细胞的制备方法，将合成的Leader‑scFv(CEA)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑HSV‑TK的基因片段插入到pLent‑C‑GFP载体将所述质粒转染293T细胞，包装成携带有Leader‑scFv(CEA)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑HSV‑TK编码基因的慢病毒，将所述携带有Leader‑scFv(CEA)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑HSV‑TK编码基因的慢病毒感染单核细胞诱导的异质T淋巴细胞，得到安全型抗CEA嵌合抗原受体修饰的T细胞，该发明豁免正常细胞，在保证疗效的同时降低“脱靶效应”，提高安全。

主权项

一种安全型抗CEA嵌合抗原受体修饰T细胞的制备方法，其特征在于：将Leader‑scFv(CEA)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑HSV‑TK核苷酸合成，将合成的Leader‑scFv(CEA)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑HSV‑TK的基因片段插入到pLent‑C‑GFP载体(Invitrogen)NotI‑AsiSI位点，经测序正确后，构建成质粒，将所述质粒转染293T细胞，包装成携带有Leader‑scFv(CEA)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑HSV‑TK编码基因的慢病毒，将所述携带有Leader‑scFv(CEA)‑CD8‑CD137‑CD3ζ‑T2A‑HSV‑TK编码基因的慢病毒感染单核细胞诱导的异质T淋巴细胞，得到安全型抗CEA嵌合抗原受体修饰的T细胞。