[发明专利]利用异养培养平滑菱形藻生产岩藻黄素的方法

摘要

本发明属于微生物的培养，特别是指一种利用异养培养平滑菱形藻生产岩藻黄素的方法。包括种子液的制备、发酵培养、发酵结束后的发酵液中提取岩藻黄素等步骤，本发明解决了现有技术中存在的异养条件下平滑菱形藻的生物量浓度、岩藻黄素产率及岩藻黄素含量低等问题。具有所制备的平滑菱形藻干燥藻粉中岩藻黄素的含量高，岩藻黄素的产率高，较大型海藻来源的岩藻黄素更安全，在提高生产效率、降低生产成本的同时，大大降低了培养过程中的污染风险等优点。

主权项

利用异养培养平滑菱形藻生产岩藻黄素的方法，其特征在于包括如下步骤：A、种子液的制备将活化好的平滑菱形藻置于无菌种子培养基中异养培养3‑11天制成种子液，使平滑菱形藻细胞处于对数生长期；B、发酵培养将步骤A中的种子液按照体积比为3％‑20％的接种量转接入无菌发酵培养基中进行摇床培养制备发酵液，培养温度20℃‑30℃，培养周期3‑11天；所述的种子培养基及发酵培养基包括如下含量范围的原料：NaCl 10g/L‑32g/L；MgSO4·7H2O 1.09g/L‑2.18g/L；CaCl2·2H2O 0.1g/L‑0.27g/L；KH2PO4 0.031g/L‑0.062g/L；K2HPO4 0.00375g/L‑0.0075g/L；FeCl3·6H2O 0.291mg/L‑0.582mg/L；MnCl2·4H2O 0.025mg/L‑0.246mg/L；ZnCl20.031mg/L‑0.311mg/L；CoCl2·6H2O 0.0114mg/L‑0.0228mg/L；Na2MoO4·2H2O0.012mg/L‑0.024mg/L；H3BO3 3.06g/L‑30.56g/L；(NH4)6MO7O24·4H2O 0.028mg/L‑0.278mg/L；Tris‑buffer 0.089g/L‑0.892g/L；H2SO4 1.64μg/L‑16.4μg/L；vitamin B12 1.5g/L‑15×10‑5g/L；biot in 2.5g/L‑25×10‑5g/L；有机碳源2g/L‑50g/L；氮源0.4g/L‑7g/L；硅酸盐20mg/L‑700mg/L；pH＝6‑9；所述有机碳源包括但不限限于：葡萄糖、淀粉水解物、果葡糖浆、蔗糖或其组合；所述氮源选用有机氮源、无机氮源或其组合，其中有机氮源包括但不限于：酵母膏、蛋白胨、酵母提取物、氨基酸、尿素、蛋白水解物或其组合，无机氮源包括但不限于选用硝酸钾、硝酸钠、氯化铵、碳酸氢铵或其组合；所述硅酸盐包括但不限于硅酸钠、硅酸钾、硅酸氨或其组合；所述的平滑菱形藻选自平滑菱形藻(Nitzschia laevis)UTEX 2047、平滑菱形藻(Nitzschia laevis)CCMP 559、平滑菱形藻(Nitzschia laevis)CCMP 1092、平滑菱形藻(Nitzschia laevis)O‑7；C、从步骤B发酵结束后的发酵液中提取岩藻黄素。