[发明专利]一种MDA‑MB‑231乳腺癌细胞的复苏方法在审
申请号: | 201710527024.6 | 申请日: | 2017-06-30 |
公开(公告)号: | CN107164329A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 曹先艳;王文峰;施亮 | 申请(专利权)人: | 太仓东浔生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09 |
代理公司: | 苏州市方略专利代理事务所(普通合伙)32267 | 代理人: | 马广旭 |
地址: | 215400 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种MDA‑MB‑231乳腺癌细胞的复苏方法,将冻存的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞冻存管从液氮或者‑80℃冰箱中取出,在取出后1min内于37℃摇晃至含有冻存液的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞液完全融化,将MDA‑MB‑231乳腺癌细胞液加入到盛有2‑3ml新鲜培养基的离心管中,用移液枪上下吹打20‑30次,于1000‑1500g/min的转速下离心3‑10min;移去上清液,加入1‑2ml的新鲜培养基,用移液枪上下吹打40‑50次,然后均匀的加入到盛有7‑9ml的细胞培养皿中,于37℃,5%CO2培养箱中培养。 | ||
搜索关键词: | 一种 mda mb 231 乳腺 癌细胞 复苏 方法 | ||
【主权项】:
一种MDA‑MB‑231乳腺癌细胞的复苏方法,其特征在于:包括以下步骤:将冻存的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞冻存管从液氮或者‑80℃冰箱中取出,在取出后1min内于37℃摇晃至含有MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用冻存液的MDA‑MB‑231乳腺癌细胞液完全融化,将MDA‑MB‑231乳腺癌细胞液加入到盛有2‑3ml新鲜MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用培养基的离心管中,用移液枪上下吹打20‑30次,于1000‑1500g/min的转速下离心3‑10min;移去上清液,加入1‑2ml的新鲜MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用培养基,用移液枪上下吹打40‑50次,然后均匀的加入到盛有7‑9ml的新鲜MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用培养基的细胞培养皿中,于37℃,5%CO2培养箱中培养;所述MDA‑MB‑231乳腺癌细胞专用冻存液以重量组分计,包括以下组分:二甲基亚砜5‑15份、羟甲基淀粉2‑5份、海藻糖3‑12份、维生素E0.5‑3份、25%山梨醇1‑5份、丙二醇0.8‑1.6份、(S)‑(‑)‑1‑(4‑氟异喹啉‑5‑基)磺酰基‑2‑甲基‑1,4‑二氮环庚烷0.5‑2份和基础培养基80‑90份。
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