[发明专利]一种用于多杀菌素工业化大生产的提取工艺

摘要

本发明涉及一种用于多杀菌素工业化大生产的提取工艺，包括步骤：发酵液预处理，板框过滤，闪蒸烘干；甲醇浸泡菌丝；浓缩浸提液，转相水洗；使用酒石酸反萃取；调节ph离心得到多杀菌素粗品；利用甲醇重结晶得到多杀菌素精品。本发明采用菌丝分离烘干后浸提的方式提取多杀菌素，浸取效率高，溶媒使用量小，仅为发酵液直接溶媒萃取的一半，且能耗相对较低，生产周期缩短；另外，板框过滤、闪蒸烘干、浸提、浓缩、水洗、反萃取、精制所需的设备比较普遍，很容易实现工业化生产；所得产品收率高，达到了85％～90％，采用溶媒重结晶纯化多杀菌素粗结晶后提升了多杀菌素的质量，产品含量达到了95％～98％。

主权项

一种低溶媒、高收率多杀菌素的工业化提取方法，包括步骤如下：(1)向发酵液中加入珍珠岩助滤剂、黄血盐和硫酸锌，混合均匀，然后升温至85‑90℃，保温搅拌1‑3小时，得预处理后发酵液；(2)预处理后发酵液利用板框压滤机过滤，收集滤饼；(3)将收集得到的滤饼闪蒸干燥至含水量为5％～10％，得到干菌丝；(4)将干菌丝投入到浸提柱中，用低沸点有机溶剂浸泡1～2小时，从浸提柱顶端通入氮气，收集有机溶剂浸提浓液，然后以每小时0.3～0.5m3的流速从顶端加入低沸点有机溶剂进行洗脱，当料液效价达到100u/ml时停止，合并浸提液；(5)合并后的浸提液真空浓缩除去低沸点有机溶剂，浓缩至油膏状，按照油膏重量：非水溶性有机溶剂体积＝1:5～6，单位：kg/m3；加入非水溶性有机溶剂，升温搅拌溶解，得到多杀菌素转相液，(6)多杀菌素转相液进行水洗，水洗后的转相液中加入酸水进行反萃取，静置分层，收集酸水相；(7)除酸水相中的有机溶剂，调节ph＝9.0～11.0，过滤得到多杀菌素粗结晶；(8)向多杀菌素粗结晶中加入结晶溶剂，升温溶解后过滤除去不溶性杂质，收集滤液，真空浓缩滤液，然后缓慢滴加纯化水，缓慢降温至5～10℃，养晶，离心，真空烘干后，得到多杀菌素精粉。