[发明专利]一种从早香柚油胞层中分离纯化佛手柑素的方法

摘要

本发明提供一种从早香柚油胞层中分离纯化佛手柑素的方法，采用硅胶柱色谱和高速逆流色谱(HSCCC)联用技术，以早香柚油胞层冷干粉为原料，先制备硅胶粗提物粉末，再经HSCCC进一步分离纯化得到高纯度的佛手柑素。本发明工艺简单，不需要惰性气体保护及高温高压；生产周期短，流程安全、易操作；整个过程使用HPLC精确定量，准确度高；提取和HSCCC所用溶剂可回收后反复使用，成本低。本发明纯化的产物纯度高，回收率高，最终纯化得到的佛手柑素纯度≥94％，适用于科学研究和工业化生产。

主权项

1.一种从早香柚油胞层中分离纯化佛手柑素的方法，其特征在于，通过以下步骤实现：（1）制备硅胶粗提物粉末：按固液比1:20取一定质量烘干的提取材料早香柚油胞层与60~90℃的石油醚超声提取两次，过滤后合并两次滤液，在旋转蒸发仪上蒸干得浸膏，与适量硅胶拌样，挥干，制成上样粉末，按上样量与硅胶用量为1 g:50 g的比例装柱，加入上样粉末后开始洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥得硅胶粗提物粉末；（2）分离纯化佛手柑素：配制己烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水溶剂系统，充分摇匀静置1 h后，分别接出上、下相，超声脱气30 min，上相为固定相，下相为流动相， 固定相先以30 mL/min流速泵入高速逆流色谱，稳定后，将逆流色谱仪的转速调至900 rpm，同时流动相以2 mL/min速度通过高速逆流色谱，待流出液分层后，将硅胶粗提物溶于适量固定相进样，根据检测图谱分管收集各组分，用高效液相色谱测定各管纯度，合并含有单一佛手柑素的各管，将溶液中的有机溶剂在旋转蒸干仪上40℃充分蒸发后，剩余水溶液转移至冷冻干燥仪中冻干，最终得到高纯度佛手柑素；其中步骤（1）所述的上硅胶柱洗脱条件为用石油醚‑乙酸乙酯为13:1的溶液洗脱，合并含有佛手柑素的洗脱液；步骤（2）配制的溶剂体系选用体积比1:1:2:0.625的己烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水。