[发明专利]一种TaqMan探针荧光定量PCR检测鸽支原体的试剂盒

摘要

一种TaqMan探针荧光定量PCR检测鸽支原体的试剂盒，本发明以鸽支原体特异性的一段基因片段为靶序列，设计PCR引物和TaqMan探针，建立并公开了一种检测鸽支原体的TaqMan实时荧光定量PCR试剂盒。该方法对鸽支原体的检测具有很强的特异性，除目标菌外，其它种的支原体基因组DNA均无扩增信号；所设计的探针具有极高的敏感性，最低检测限可达每个PCR反应检出10个拷贝的目的基因；十倍倍比稀释标准品，3次重复实验均具有很好的重复性，表明该方法稳定，数据可靠。实验证明，利用本发明所建立的鸽支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法，可为鸽支原体相关流行病学的调查、临床诊断及疾病监测提供一种快速、准确的实验室检测手段，具有良好的应用前景。

主权项

本发明提供一种TaqMan探针荧光定量PCR检测鸽支原体的试剂盒其特征在于，鸽支原体试剂盒包含扩增预混液、阴性对照，其特征在于：还包含有阳性对照、columb XW‑F和columb XW‑R的扩增引物序列及columb XW‑probe探针序列的混合物；所述序列columb XW‑F和columb XW‑R为：上游引物columb XW‑F：5′‑GTTCTTTCTCGTGATAAAGGCG‑3′下游引物columb XW‑R：5′‑CAAGATATGGCATATCTTCTTCCGG‑3′所述探针序列为：columb XW‑probe：5′‑F‑CAAAGTCGGAGATAAAATGGCTG‑Q‑3′其中F为荧光报告基团，Q为荧光淬灭基团。