[发明专利]一种血液循环肿瘤DNA点突变检测方法在审
| 申请号： | 201710545914.X | 申请日： | 2017-07-06 |
| 公开（公告）号： | CN107287309A | 公开（公告）日： | 2017-10-24 |
| 发明（设计）人： | 罗保君 | 申请（专利权）人： | 罗保君 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人： | 关畅,白艳 |
| 地址： | 100039 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种血液循环肿瘤DNA点突变检测方法。本发明提供的成套引物，包括扩增突变型靶序列的特异性引物和阻断序列；所述突变型靶序列为所述突变型cfDNA含有突变位点的区域；所述扩增突变型靶序列的特异性引物由突变型上游引物和突变型下游引物组成；所述突变型上游引物和所述突变型下游引物均与所述突变型靶序列结合，且所述突变型下游引物的3’末端最后一个碱基与所述突变型靶序列中位于所述突变位点的突变碱基互补；所述阻断序列与野生型靶序列中含有野生型碱基片段互补。本发明的方法具有敏感性高、特异性强、耗时短和成本低的优点，且可以同时检测多个指标。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 血液循环 肿瘤 dna 突变 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种荧光定量PCR检测突变型cfDNA或其含有突变位点的部分片段的成套引物，包括扩增突变型靶序列的特异性引物和阻断序列；所述突变型靶序列为所述突变型cfDNA含有突变位点的区域；所述扩增突变型靶序列的特异性引物由突变型上游引物和突变型下游引物组成；所述突变型上游引物和所述突变型下游引物均与所述突变型靶序列结合，且所述突变型下游引物的3’末端最后一个碱基与所述突变型靶序列中位于所述突变位点的突变碱基互补；所述阻断序列与野生型靶序列中含有野生型碱基片段互补，所述野生型靶序列为所述突变型靶序列核苷酸序列中位于所述突变位点的突变碱基恢复为野生型碱基，使该突变位点变为野生型位点，其余核苷酸不变，得到的序列；所述阻断序列的3’端封闭标记；所述突变型cfDNA为与野生型cfDNA相比存在突变碱基的cfDNA。
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