[发明专利]避免信号干扰的肌原纤维蛋白丝氨酸磷酸化水平的测定方法有效
| 申请号： | 201710556733.7 | 申请日： | 2017-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN107219369B | 公开（公告）日： | 2019-06-25 |
| 发明（设计）人： | 李铮;张德权;陈丽;杜曼婷;李欣;王振宇;侯成立;潘腾;赵梦雅 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院农产品加工研究所 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 史霞 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供的避免信号干扰的肌原纤维蛋白丝氨酸磷酸化水平的测定方法，通过蛋白质免疫印迹技术在宰后肌肉中检测出不同肌原纤维蛋白丝氨酸磷酸化水平，所需的肌肉样品量少，操作过程较为简单，重复性好，检测所得条带清晰，实验价格低，是一种高效测定宰后肌肉中肌原纤维蛋白丝氨酸磷酸化水平的方法。利用该方法可对羊骨骼肌中丝氨酸磷酸化肌原纤维蛋白的生化变化进行研究分析，也可延伸至其他动物肌肉生理生化的研究。 | ||
| 搜索关键词： | 避免 信号 干扰 纤维蛋白 丝氨酸 磷酸化 水平 测定 方法 | ||
【主权项】：
1.避免信号干扰的肌原纤维蛋白丝氨酸磷酸化水平的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：将肌原纤维蛋白样品的蛋白浓度调至2μg/μL；将蛋白marker及肌原纤维蛋白样品分别上样至不同电泳泳道，电泳电压采用恒压200V，待肌原纤维蛋白样品溴酚蓝标记跑至距离胶底物0.5mm停止电泳；通过蛋白质免疫印迹方法检测肌原纤维蛋白样品中丝氨酸磷酸化水平；其中，蛋白marker与肌原纤维蛋白两条泳道之间留一条空白泳道；与第一抗体混合之前，沿蛋白marker用铅笔水平划线并延伸至蛋白marker与肌原纤维蛋白间空余的条带，并将该条带垂直剪开，将剩余肌原纤维蛋白部分与所述第一抗体混合孵育。
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