[发明专利]基于双链探针的液相杂交捕获试剂盒、洗涤试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 201710560804.0 | 申请日： | 2017-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN107354207B | 公开（公告）日： | 2019-12-10 |
| 发明（设计）人： | 赵金银;李宏志;姜旭;刘琦;许立志;于闯;李杰 | 申请（专利权）人： | 大连晶泰生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6874 | 分类号： | C12Q1/6874 |
| 代理公司： | 11225 北京金信知识产权代理有限公司 | 代理人： | 张皓;徐琳 |
| 地址： | 116635 辽宁省大连市经济*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基因组测序文库杂交捕获试剂盒、洗涤试剂盒以及它们在液相杂交捕获中的应用。所述捕获试剂盒包括2×浓度溶液以及100％去离子甲酰胺，其中，所述2×浓度溶液包含100‑150mM的磷酸二氢钠、4×柠檬酸钠缓冲液、1‑3mM的乙二胺四乙酸、2×Denhardt溶液、2‑5mg/ml的Carrier RNA及15‑20w/w％的硫酸葡聚糖，其中，所述4×柠檬酸钠溶液包含0.6M氯化钠、0.06M柠檬酸钠，pH7.0；并且所述2×Denhardt溶液包含0.04％聚蔗糖400、0.04％聚乙烯吡咯烷酮以及0.04％牛血清蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 浓度溶液 氯化钠 聚乙烯吡咯烷酮 柠檬酸钠缓冲液 柠檬酸钠溶液 乙二胺四乙酸 磷酸二氢钠 硫酸葡聚糖 牛血清蛋白 捕获试剂 测序文库 柠檬酸钠 洗涤试剂 液相杂交 杂交捕获 基因组 甲酰胺 聚蔗糖 试剂盒 捕获 离子 应用 | ||
【主权项】：
1.一种基因组测序文库杂交试剂盒，其包含杂交捕获试剂盒以及洗涤溶液试剂盒，/n所述杂交捕获试剂盒包括2×浓度溶液以及100%去离子甲酰胺，/n其中，所述2×浓度溶液为100mM的磷酸二氢钠、4×柠檬酸钠缓冲液、2 mM的乙二胺四乙酸、2×Denhardt溶液、2 mg/ml的Carrier RNA及20 w/w%的硫酸葡聚糖，/n其中，所述4×柠檬酸钠溶液为0.6 M氯化钠、0.06M柠檬酸钠，pH7.0；/n并且，所述2×Denhardt溶液为0.04%聚蔗糖400、0.04%聚乙烯吡咯烷酮以及0.04%牛血清蛋白；/n所述洗涤溶液试剂盒包括以下5种洗涤缓冲液组分：/n1) Stringent洗涤溶液：2×柠檬酸钠缓冲液，30%v/v%去离子甲酰胺；/n2) 洗涤溶液I：2×柠檬酸钠溶液，0.1% 十二烷基硫酸钠（SDS）；/n3) 洗涤溶液II：2×柠檬酸钠溶液；/n4) 洗涤溶液III：0.2×柠檬酸钠溶液；以及/n5) 链霉亲和素磁珠洗涤溶液：10 mM Tris-HCl pH 7.5，1 mM EDTA以及2M NaCl，/n其中，所述2×柠檬酸钠溶液为0.3 M氯化钠以及0.03 M柠檬酸钠，pH7.0，并且，所述0.2×柠檬酸钠溶液为0.03 M氯化钠以及0.003 M柠檬酸钠，pH7.0。/n
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