[发明专利]一种用于培养金花葵愈伤组织增殖的培养基及其培养方法有效
申请号: | 201710561898.3 | 申请日: | 2017-07-11 |
公开(公告)号: | CN107155895B | 公开(公告)日: | 2019-06-07 |
发明(设计)人: | 郭永霞;王丽艳;荆瑞勇;李睿瑞;杨帆;韩如月 | 申请(专利权)人: | 黑龙江八一农垦大学 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;A01H4/00 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 夏艳 |
地址: | 163319 黑*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明涉及植物组织培养技术领域,具体来说是一种用于培养金花葵愈伤组织增殖的培养基及其培养方法,其配方为:MS基础培养基、6‑苄氨基嘌呤0.5‑1.5mg/L、萘乙酸0.1‑1mg/L、2,4二氯苯氧乙酸0.5‑2mg/L、蔗糖30g/L和植物琼脂7‑8g/L。本发明的目的是提供一种用于培养金花葵愈伤组织增殖的培养基及其培养方法,专门适用于金花葵愈伤组织培养,愈伤组织培养基的筛选为下一步进行大规模的悬浮细胞培养奠定基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 培养 金花 葵愈伤 组织 增殖 培养基 及其 方法 | ||
【主权项】:
1.一种培育金花葵愈伤组织的方法,其特征在于,所述培养方法步骤为:(1)将未开放的花蕾在洗衣粉水中漂洗10‑15min后,在流水下冲洗20‑30min,在超净工作台上用70%‑75%的无水乙醇消毒30‑45s,然后用2%NaClO消毒8‑10min,再用无菌水冲洗5‑6次,备用;(2)初代愈伤组织诱导:将消毒好的花蕾用镊子和刀将花瓣分离出来,接种于添加6‑苄基腺嘌呤0.5mg/L+萘乙酸0.5mg/L+2,4二氯苯氧乙酸1.5mg/L+30g/L蔗糖+8g/L琼脂的MS培养基中,光强1500~2000Lx,每日光照时数12~14h,25±2℃培养20d,诱导出初代愈伤组织;(3)继代培养:将培养20d的初代愈伤组织切成大小为0.25g的小块,接入MS基础培养基、6‑苄氨基嘌呤0.5‑1.5mg/L、萘乙酸0.1‑1mg/L、2,4二氯苯氧乙酸0.5‑2mg/L、蔗糖30g/L和植物琼脂7‑8g/L中培养15d。
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