[发明专利]一种检测牛支原体的CPA检测方法及其试剂盒与应用

摘要

本发明公开了一种检测牛支原体的CPA检测方法及其试剂盒与应用，该引物包括5条引物，采用交叉引物恒温扩增技术对待检测样品的DNA进行扩增，本发明可以100%扩增到临床分离到的牛型支原体，且特异性强，能够与其他常见牛源病原菌进行区分。本发明灵敏度高、检测耗时短、实用性强，不需要昂贵的精密仪器，反应1小时可检出10个拷贝以上的阳性质粒。

主权项

一种用于检测牛支原体的CPA引物，其特征是，根据牛支原体特异性基因UvrC设计5条引物，并分别对两条引物的5’末端进行荧光素和生物素标记，所述引物包括：MPB2‑BF：5'‑ TAT TGA CGT ATT TGC TTA T ‑3'，序列如SEQ ID NO ：1所示；MPB2‑CPF：5'‑ CTT AAA CCT AGT GGA ATT GCC TTC TAT CGC TAT GGA ATA T ‑3'，序列如SEQ ID NO ：2所示；MPB2‑DR：5'‑ 6‑FAM‑TTA AAT TAA CCT TGT TGA T ‑3'，序列如SEQ ID NO ：3所示；MPB2‑MBR：5'‑ BIOTIN‑CTT AAA CCT AGT GGA ATT G ‑3'，序列如SEQ ID NO ：4所示；MPB2‑BR：5'‑ AAA TTA TCT GGC AGT ATT T ‑3'，序列如SEQ ID NO ：5所示。