[发明专利]一种基于共价有机骨架材料的磁性固相萃取剂及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种基于共价有机骨架材料的磁性固相萃取剂及其制备方法和应用。该磁性固相萃取剂包括四氧化三铁磁纳米颗粒内核以及核外依次包裹的聚多巴胺层和共价有机骨架材料COF‑5层。将功能化的磁纳米颗粒加入待处理的糖蛋白样品中，充分搅拌萃取，然后用磁铁将磁纳米颗粒与溶液分离，再加洗脱液将糖蛋白从磁纳米颗粒上洗脱下来并进行测定。共价有机骨架材料能够选择性富集糖蛋白，有效地将糖蛋白与杂质分离，故该方法对糖蛋白具有良好的萃取效果。本发明提供的固相萃取方法操作步骤简单、时间短、回收率高、有机溶剂消耗少，适用于血浆、尿液等复杂生物样品中糖蛋白的富集和测定。

主权项

1.一种基于共价有机骨架材料的磁性固相萃取剂，其特征在于，包括四氧化三铁磁纳米颗粒内核以及核外依次包裹的聚多巴胺层和共价有机骨架材料COF‑5层，其通过以下步骤制备：1）四氧化三铁磁纳米颗粒的制备：将0.5~1.0 g FeCl₂·4H₂O溶解于水中，在通氮气的情况下依次加入2 M的 KNO₃溶液10 mL和1 M的NaOH溶液10 mL，再加入1.5~2.0 g 50% PEI溶液，然后将该混合溶液放于90~95℃加热套反应1.5~2 h, 用磁铁收集磁纳米颗粒，用水和无水乙醇清洗数次，在60℃烘箱内烘干待用；2）共价有机骨架材料COF‑5修饰的四氧化三铁磁纳米颗粒的制备，包括以下步骤：（1）配置1 mg/mL的多巴胺溶液，加入Tris，调节pH至8.5～9，震荡摇匀，暴露于空气中进行预氧化；（2）称取1~2 g步骤1）制备的四氧化三铁磁纳米颗粒，加到15~20 mL步骤（1）所得的多巴胺碱性溶液中，40~45℃搅拌反应0.5~1 h，用磁铁收集磁纳米颗粒，洗涤，烘干，得到表面修饰有聚多巴胺的磁纳米颗粒；（3）称取50~100 mg步骤（2）得到的表面修饰有聚多巴胺的磁纳米颗粒，加入2~4 mL 1,4‑苯二硼酸和2,3,6,7,10,11‑六羟基三苯的混合反应溶液，超声60~90 min，加热反应，反应温度为105～120 ℃，反应时间为18～22 h，同时伴有搅拌；用磁铁收集磁纳米颗粒，用水和甲醇清洗数次，60℃烘干，得到表面修饰COF‑5的磁纳米颗粒；（3）中所述的混合反应溶液中1,4‑苯二硼酸和2,3,6,7,10,11‑六羟基三苯的摩尔浓度比为1~3：1，且1,4‑苯二硼酸的摩尔浓度为0.1 mM~3 mM，所述的1,4‑苯二硼酸和2,3,6,7,10,11‑六羟基三苯混合反应溶液的溶剂为等体积比的均三甲苯和1,4‑二氧六环。