[发明专利]一种基于CRISPR-Cas9系统的地衣芽孢杆菌基因组编辑载体及其制备方法有效
| 申请号： | 201710590555.X | 申请日： | 2017-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN107400677B | 公开（公告）日： | 2020-05-22 |
| 发明（设计）人： | 石贵阳;李由然;张梁;丁重阳;顾正华 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/75 | 分类号： | C12N15/75;C12N15/66;C12N1/21;C12R1/10 |
| 代理公司： | 无锡华源专利商标事务所(普通合伙) 32228 | 代理人： | 聂启新 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9系统的地衣芽孢杆菌基因组编辑载体，所述地衣芽孢杆菌基因组编辑载体的制备方法为：将Cas9蛋白表达框和sgRNA scaffold表达框整合在出发载体pHY xyl中，获得pHY‑Cas9‑sgRNA scaffold，然后将以amyL为靶位点设计合成的多条sgRNA片段中的任意一条整合到所述的pHY‑Cas9‑sgRNA scaffold中，制得所述地衣芽孢杆菌基因组编辑载体。本发明可以大幅改善当前地衣芽孢杆菌基因编辑困难的现状，显著提高基因编辑的效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 crispr cas9 系统 地衣 芽孢 杆菌 基因组 编辑 载体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种基于CRISPR‑Cas9系统的地衣芽孢杆菌基因组编辑载体，其特征在于所述地衣芽孢杆菌基因组编辑载体的制备方法为：将Cas9蛋白表达框和sgRNA scaffold表达框整合在出发载体pHY xyl中，获得pHY‑Cas9‑sgRNA scaffold，然后将以amyL为靶位点设计合成的多条sgRNA片段中的任意一条整合到所述的pHY‑Cas9‑sgRNA scaffold中，制得所述地衣芽孢杆菌基因组编辑载体。
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