[发明专利]一种测定睡莲科植物基因组大小的方法在审
| 申请号： | 201710644954.X | 申请日： | 2017-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN107449717A | 公开（公告）日： | 2017-12-08 |
| 发明（设计）人： | 杨俊波;贾艳霞;贺正山 | 申请（专利权）人： | 中国科学院昆明植物研究所 |
| 主分类号： | G01N15/14 | 分类号： | G01N15/14;G01N1/28 |
| 代理公司： | 昆明协立知识产权代理事务所(普通合伙)53108 | 代理人： | 旃习涵 |
| 地址： | 650201 *** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种适用于测定睡莲科植物基因组大小的方法。该方法是以水稻(Oryza sativa)“日本晴”和玉米(Zea mays L)B73为内标，利用流式细胞术测定黄睡莲(NymphaeamexicanaZucc)、延药睡莲(NymphaeastellataWilld)和白睡莲(Nymphaea alba L.)这3种睡莲属植物的基因组大小。结果表明，3种植物的基因组大小各不相同，其中，白睡莲最大，而黄睡莲的最小。本发明将为该属植物的基因组学以及种群进化研究提供基础数据参考。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 测定 睡莲 植物 基因组 大小 方法 | ||
【主权项】：
一种测定睡莲科植物基因组大小的方法，其特征在于该方法是以水稻“日本晴”和玉米B73为内标，利用流式细胞术测定睡莲属植物的基因组大小，包括下述步骤：(1)样品准备；取睡莲科植物的新鲜嫩叶，用去离子水洗净表面尘土，滤纸吸干后放入预冷的培养皿中，加入预冷的核提取缓冲液，一次性快速切碎，整个过程，使样品浸没在解离液里；(2)样品过滤：吸取步骤(1)培养皿内的解离液，用400目的滤膜过滤到离心管中，然后置于冰上孵育10min；(3)样品染色：将步骤(2)所得样品加入RNAase，终浓度为50μg/mL，同时加入PI染液，终浓度为50μg/mL，在冰上继续避光孵育30min‑1h，孵育期间摇动几次；(4)上机检测：将上述(3)步骤所得样品移至上样管，上机检测，收集20000个细胞。
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