[发明专利]一种肿瘤血管阻断剂融合蛋白的纯化方法有效
| 申请号： | 201710647036.2 | 申请日： | 2017-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN107400169B | 公开（公告）日： | 2021-05-14 |
| 发明（设计）人： | 史权威;潘向辉;李延虎;杨子义 | 申请（专利权）人： | 北京华安科创生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C07K1/14;A61K38/17;A61K47/64;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;陈征 |
| 地址： | 100085 北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种肿瘤血管阻断剂融合蛋白的纯化方法，本发明方法是将大肠杆菌表达的、以包涵体形式存在的肿瘤血管阻断剂融合蛋白的发酵菌体通过高压均质机破碎、高速离心，得到粗制包涵体。用不同洗涤溶液洗涤，得到较净的包涵体，然后经过8M尿素变性溶解包涵体，离心取上清，再用透析法复性。复性后样品经过离子交换、分子筛柱纯化后，得到的目的蛋白SDS‑PAGE电泳纯度和RP‑HPLC纯度均能达到95％以上。本发明提供的纯化方法简便，成本低，易操作，易于产业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 肿瘤 血管 阻断剂 融合 蛋白 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种肿瘤血管阻断剂融合蛋白的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)破菌：能够表达肿瘤血管阻断剂融合蛋白的菌体加入溶解液搅拌破碎后，离心，取沉淀；(2)沉淀：沉淀经三步洗涤，收集最后一步洗涤后的沉淀，得粗制包涵体；(3)变性：沉淀加入变性液，重悬至复溶后，搅拌，离心，收集上清液；(4)复性：过滤上清液，加透析袋中，复性液透析复性；(5)纯化：柱层析，超滤浓缩置换溶液，排阻层析。
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