[发明专利]酶引导晶体生长增强拉曼光谱表面效应检测双酚A的方法

摘要

本发明提供一种酶引导晶体生长增强拉曼光谱表面效应检测双酚A的方法，包括：巯基化的适配体和葡萄糖氧化酶、偶联剂溶液混合，将金种加入到氯金酸溶液中，同时迅速加入抗坏血酸和硝酸银溶液，制备金纳米星，再加入适配体互补链DNA2溶液进行偶联，进一步加入4‑硝基苯硫酚乙醇溶液，制备AuNS‑GOx探针溶液，并在AuNS表面生长Ag壳。本发明成功制备了基于AuNS检测双酚A的超灵敏SERS传感器，首次将酶‑引导晶体生长策略应用于构建SERS生物传感器，建立了目标物浓度与SERS特征峰信号强度之间的线性关系，检测限低至10^‑16g/mL，低于目前报道的多数方法，可实现食品安全中双酚A的超灵敏检测。

主权项

1.一种酶引导晶体生长增强拉曼光谱表面效应检测双酚A的方法，其特征在于，包括步骤：(1)适配体与葡萄糖氧化酶偶联物的制备：巯基化的适配体溶液和葡萄糖氧化酶、偶联剂的溶液混合，制得适配体与葡萄糖氧化酶偶联物溶液；所述偶联剂为4‑(N‑马来酰亚胺甲基)环己烷‑1‑羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐；(2)AuNS的制备：通过向HAuCl₄溶液中加入柠檬酸三钠，获得Au种的溶液；将Au种的溶液加入到HAuCl₄溶液中，同时迅速加入抗坏血酸和AgNO₃溶液，室温孵化直至溶液由浅红变为墨绿色；(3)功能化AuNS的制备：向步骤(2)制备的AuNS溶液中加入与所述巯基化的适配体互补的DNA2溶液，再加入4‑硝基苯硫酚乙醇溶液，常温振荡孵化10～15h，通过固液分离除去多余的DNA2和4‑硝基苯硫酚，沉积物复溶于超纯水中；(4)AuNS‑GOx探针的制备：向步骤(3)得到的功能化AuNS溶液中加入适配体与葡萄糖氧化酶偶联物溶液，再加入不同浓度的双酚A标准样品溶液，常温孵化后，固液分离，固体物复溶于2‑(N‑吗啉)‑乙磺酸缓冲液中；(5)AuNS的Ag壳生长：向步骤(4)得到的AuNS‑GOx探针溶液中加入葡萄糖溶液，孵化后加入AgNO₃，常温孵化后测定表面增强拉曼散射信号。