[发明专利]一种二氢硫辛酰胺脱氢酶突变体蛋白及其制备方法和应用有效
申请号: | 201710650938.1 | 申请日: | 2017-08-02 |
公开(公告)号: | CN107267474B | 公开(公告)日: | 2020-06-30 |
发明(设计)人: | 陈晶瑜;孟娇 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/62 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种二氢硫辛酰胺脱氢酶突变体蛋白及其制备方法和应用。本发明提供了一种蛋白质(IAA350/351/358VVV突变体蛋白),为将二氢硫辛酰胺脱氢酶进行点突变甲和点突变乙和点突变丙得到的蛋白质;点突变甲为将二氢硫辛酰胺脱氢酶第350位氨基酸残基由I突变为V;点突变乙为将二氢硫辛酰胺脱氢酶第351位氨基酸残基由A突变为V;点突变丙为将二氢硫辛酰胺脱氢酶第358位氨基酸残基由A突变为V。本发明提供的突变体蛋白,对NADH抑制的敏感性降低,使得PDH在厌氧大肠杆菌培养物中对NADH的耐受性增加,能有效提高PDH的活性。本发明对于大肠杆菌生产琥珀酸盐、乙醇、丁醇、1,3‑丙二醇等还原化学物质具有广泛的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 二氢硫辛酰胺 脱氢酶 突变体 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种蛋白质,为如下(a1)或(a2):(a1)将二氢硫辛酰胺脱氢酶进行点突变甲和点突变乙和点突变丙得到的蛋白质;所述点突变甲为将二氢硫辛酰胺脱氢酶第350位氨基酸残基由I突变为V;所述点突变乙为将二氢硫辛酰胺脱氢酶第351位氨基酸残基由A突变为V;所述点突变丙为将二氢硫辛酰胺脱氢酶第358位氨基酸残基由A突变为V;(a2)在(a1)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。
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