[发明专利]一种北美玉兰离体快繁方法

摘要

本发明提供一种北美玉兰离体快繁方法，包括材料准备、选取外植体、外植体消毒、准备启动培养基、启动培养、分化培养、培育组培苗及炼苗步骤。所述的选取外植体：在室外选取玉兰单株，剪取外植体，剪取外植体时温度为15℃，湿度为46%；剪取的外植体为：带腋芽茎段，要求：茎段半木质化，有2个饱满的腋芽，茎段长度为2.8cm。启动培养：控制培养条件为：控制温度23±0.5℃，光照时间为12 h/d，光照强度为2500 Lx，湿度为50%。采用本发明北美玉兰离体快繁方法培育北美玉兰成活率高达99.5%。

主权项

1.一种北美玉兰离体快繁方法，其特征在于：包括材料准备、选取外植体、外植体消毒、准备启动培养基、启动培养、分化培养、培育组培苗及炼苗步骤；所述的选取外植体：在室外选取玉兰单株，剪取外植体，剪取外植体时温度为15℃，湿度为46%；剪取的外植体为：带腋芽茎段，要求：茎段半木质化，有2个饱满的腋芽，茎段长度为2.8cm；所述的外植体消毒：将外植体置于三角瓶内，加入洗洁精和水，不断摇晃，清洗14min；再用清水反复冲洗3次，冲洗干净；将外植体用75%的酒精消毒1min；再用0.1%的升汞消毒7min；无菌水冲洗8次；所述的启动培养基配方为：NH₄NO₃ 1.650 g/L、KNO₃ 1.900 g/L、CaCl_２·2H₂O 440 mg/L、MgSO₄·7H₂O 370 mg/L、KH₂PO₄ 700 mg/L、KI 0.83 mg/L、H₃BO₃ 6.2 mg/L、MnSO₄·4H₂O 22.3 mg/L、ZnSO₄·7H₂O 8.6 mg/L、Na₂MnO₄·2H₂O 0.25 mg/L、CuSO₄·5H₂O 0.025 mg/L、CoCl₂·6H₂O 0.025 mg/L、FeSO₄·7H₂O 27.8 mg/L、Na₂‑EDTA·2H₂O 37.3 mg/L、肌醇 100 mg/L、烟酸 0.5 mg/L、盐酸吡哆醇0.5 mg/L、盐酸硫胺素0.5 mg/L、甘氨酸 2 mg/L、6‑BA 0.4 mg/L、IBA 0.5 mg/L、蔗糖25 g/L、琼脂9 g/L；所述的分化培养：将新萌发的腋芽接种到分化培养基上，分化培养基为：MS培养基+6‑BA 0.1 mg/L +IBA 0.02 mg/L+蔗糖26 g/L+琼脂 9 g/L，调节pH为6.2；所述的培育组培苗：将丛生芽接种到壮苗生根培养基上，所述的壮苗生根培养基为MS培养基+6‑BA 0.3mg/L +鱼肝油0.05 mg/L+松花粉0.1 mg/L +蔗糖25 g/L+琼脂 9 g/L，调节pH为6.8；所述的炼苗：将组培苗移栽于培养基质中，覆膜，在光照强度为3200 Lx的条件下，控制温度为28℃，湿度为65%；所述的培养基质由蛭石、珍珠岩、黄麻、桂皮粉、石墨烯、草炭按照10：7：1：3：4：7的质量比混合，喷入水，控制含水量为35‑40%。