[发明专利]一种三维多孔结构的人工皮肤及制备方法

摘要

本发明公开了一种三维多孔结构的人工皮肤及制备方法。采用如下方法制备(1)利用“溶剂‑盐析‑透析‑溶剂”序贯处理流程，提取、纯化生物材料，且提高其溶解度；(2)配置不同浓度材料溶液，冷冻干燥，交联剂交联，制备不同孔径的单层人工皮肤；(3)对上述单层人工皮肤进行细胞、动物疗效验证；(4)按照人类皮肤孔径梯度规律，首先将不同孔径的人工皮肤叠加，加压固定，然后浸入可溶解该材料的溶剂“水化”处理，最后冷冻干燥，保存。经动物实验证实，本方法制备的仿生皮肤显著促进创面愈合。

主权项

一种三维多孔结构的人工皮肤及制备方法，其特征在于：采用如下方法制备得到：(1)通过“溶剂‑盐析‑透析‑溶剂”序贯处理流程纯化生物材料，提高其溶解度：将生物材料溶解于溶剂中，持续震荡，离心，取上清液，去掉沉渣，往上清液中加入10％‑15％NaCl溶液，盐析，取沉淀物，将盐析沉淀得到的生物材料装入半透膜，透析掉盐离子，透析后的生物材料再用上述溶剂溶解，备用；(2)制作与人类皮肤有相似孔径分布梯度(浅层的孔径大于深层的孔径)的多层仿生皮肤：将步骤(1)制得的溶液，等比稀释，配置成等比浓度梯度的生物材料溶液，将上述溶液装入多孔板中，冰箱冷冻，然后放入冻干机中，冻干24‑48h，用30％戊二醛蒸汽交联，6‑12h，最后，用0.1M‑0.5M甘氨酸溶液浸泡12‑24h，中和残余的戊二醛，利用扫描电镜测量该单层人工皮肤的平均孔径，按照天然人类真皮的孔径分布梯度规律，选取合适直径的单层人工皮肤，逐层叠加起来，两侧用多孔薄片固定；(3)通过“溶剂水化‑冷冻干燥”流程，实现多层生物材料之间的无缝联结：将步骤(2)制得的多层材料进入溶剂中约10‑20分钟，进行“水化”处理，然后，将上述多层材料放入冻干机，冷冻干燥处理约24小时，干燥后，保存；(4)根据步骤(3)生物验证的结果，按照人类皮肤孔径梯度规律，首先将不同孔径的膜叠加，适当加压固定，然后浸入可溶解该材料的溶剂“水化”处理，最后冷冻干燥，实现各层之间无缝联结。