[发明专利]一种原位生成硫化银竞争型黄曲霉毒素光电化学传感器的制备方法及应用

摘要

本发明属于免疫分析和生物传感技术领域，提供了一种原位生成硫化银竞争型黄曲霉毒素光电化学传感器的制备方法及应用。采用WO₃为基底，其优良的导电性和大的表面积能有效减小背景信号。利用银离子功能化八面体钒酸铋纳米颗粒标记黄曲霉毒素，通过滴加硫化钠原位生成高光电转换率的窄带隙Ag₂S作为信号放大材料，通过可见光波长的LED灯照射下产生光电流信号。载体八面体钒酸铋与硫化银带隙匹配度良好，能进一步提高硫化银的光电转换效率，实现了常见黄曲霉毒素的检测，具有特异性强，灵敏度高，检测限低，对黄曲霉毒素的检测具有重要的科学意义和应用价值。

主权项

1.一种原位生成硫化银竞争型黄曲霉毒素光电化学传感器的制备方法，其特征在于，包括以下几个步骤：（1）将ITO导电玻璃切割至2.5cm × 1.0cm大小，依次用丙酮、乙醇和超纯水清洗30min，氮气吹干；（2）取10 µL、3 ~ 5 mg/mL的WO₃滴加到导电玻璃的导电面，室温下晾干，300℃煅烧120 min，冷却到室温，在WO₃修饰电极表面滴加3~ 5 µL、0.1mol/L的巯基乙酸，室温下晾干，滴加3 ~ 5μL的EDC/NHS混合液，4 ℃冰箱中干燥，超纯水冲洗；（3）将4~ 6 µL、10 µg/mL的黄曲霉毒素抗原滴加到电极表面，4 ℃冰箱中干燥，超纯水冲洗；（4）继续将2 ~ 4µL、质量分数为1%的BSA溶液滴加到电极表面，以封闭电极表面上非特异性活性位点，4 ℃冰箱中晾干，超纯水冲洗电极表面；（5）将5µL、10 pg/mL~ 60 ng/mL黄曲霉毒素与银离子功能化八面体钒酸铋黄曲霉毒素抗体标记物的混合液滴加到电极表面，4℃冰箱中孵化30min，继续滴加3 µL、0.08mol/L的Na₂S，4 ℃冰箱中晾干，超纯水冲洗电极表面，制得一种原位生成硫化银竞争型黄曲霉毒素光电化学传感器；所述EDS/NHS混合液是指含有1×10^‑2mol/L 的1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨丙基)碳二亚胺和2×10^‑3mol/L的N‑羟基琥珀酰亚胺的混合水溶液。