[发明专利]一种蚕砂中果胶的提取及其含量测定方法

摘要

本发明涉及蚕砂加工领域，公开了一种蚕砂中果胶的提取及其含量测定方法。该提取方法，以提取过叶绿素的蚕砂滤渣为原料，先粉碎成成粉末，利用PEG修饰的纤维素酶辅助黑曲霉提取蚕砂滤渣中的果胶，再经脱色浓缩、沉淀；抽滤、沉析回收得到果胶，采用咔哩‑硫酸法测定提取液中的果胶含量。本发明方法提取得到的果胶分子量大，提取率高，提取所得的果胶的稳定性和纯净性好；且该方法具有易分离、低污染的特性。

主权项

一种蚕砂中果胶的提取方法，其特征在于包括以下步骤：1）对蚕砂进行风力筛选，清除其中的杂质后，再加水漂洗处理；2）蚕砂清洗后加水软化，加水量为蚕砂重量的30‑40%，使蚕砂充分被水浸润4~6h，期间翻动2~3次，软化程度以将蚕砂手捏即散，但捏不出水为准；3）对蚕砂用丙酮提取叶绿素，提取后取滤渣，加入其质量3‑4倍的水，微波处理10‑20 min，在55‑65℃下干燥40‑50h，干燥后粉碎，过60‑100目筛，备用；4）配制LB培养基；5）称取步骤3）所得的蚕砂粉9‑11g，放入锥形瓶中，加入95‑105mL的1‑(2‑甲基)烯丙基‑3‑甲基咪唑氯盐离子液体，再添加0.4‑0.6wt%的PEG修饰的纤维素酶，在40‑50℃下处理50‑70min，放入85‑95℃的水浴中加热4‑6 min，加入35‑45mL的LB培养基，并接种350‑450微升的黑曲霉菌液，在30‑40℃下发酵20‑30h；6）吸取发酵后的提取液进行离心处理，吸取上清液，经活性炭脱色100~120min，在60~70℃下利用真空滤膜浓缩，浓缩后迅速冷却至室温，加入2‑4倍上清液质量的无水乙醇后进行离心处理，洗涤两次，再用60‑65wt%的乙醇洗涤两次，使果胶从溶液中呈絮状析出，在40~60℃水浴中静置10‑14h，待果胶完全沉淀后抽滤，得到粗制果胶滤饼；7）将抽滤得到的粗制果胶滤饼溶解于18‑22倍热水中后进行过滤，滤液用分析纯氨水调节pH至3‑4，用旋转蒸发仪进行浓缩后用94‑96wt%的乙醇沉析，滤饼用无水乙醇洗涤，最后得到精制的果胶。