[发明专利]三叶青藤的组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种三叶青藤的组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：1)以三叶青藤的带芽茎段为外植体，接种于繁殖复壮一体化培养基，置于培养室内培养15d，室内条件为22‑26℃，1400lux，8h/d，然后转入25‑28℃，3500‑4500lux的自然光照条件下继续培养15d，获得丛生芽；2)将步骤1)培养得到的丛生芽接种到生根炼苗同步化培养基中，于室内22‑26℃，1500lux，10h/d的条件下培养7d，再转入大棚内23‑28℃、遮光度为20‑40％、相对湿度为60‑80％的自然光下培养25d；3)移栽。本发明的方法能显著缩短种苗生产周期，降低种苗生产成本，提高种苗成活率与种苗质量。

主权项

1.一种三叶青藤的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：1)繁殖复壮一体化培养：以三叶青藤的带芽茎段为外植体，接种于繁殖复壮一体化培养基，置于培养室内培养15d，培养室温度22‑26℃，光照强度1400lux，光照时间8h/d，然后转入培养温度25‑28℃，光照强度3500‑4500lux的自然光照条件下继续培养15d，获得健壮的丛生芽，繁殖复壮一体化培养基的配方为：MS+1.0‑2.0mg/L BA+0.3‑0.5mg/L LFS+0.1‑0.3mg/L IBA+0.1‑1.0mg/L NAA；2)生根炼苗同步化培养：步骤1)培养得到的丛生芽接种到生根炼苗同步化培养基中，于室内培养温度22‑26℃，光照强度1500lux，光照时间为10h/d的条件下培养7d，再转入大棚内培养温度为23‑28℃、相对湿度为60‑80％的自然光下培养25d获得适宜移栽的完整植株，其中大棚上部覆盖遮阳网，遮光度为20‑40％，其中，生根炼苗同步化培养基的配方为：1/2MS+0.1‑0.3mg/L IBA+1.0‑2.0mg/L NAA+0.5‑1.5mg/L IAA+0.3‑0.5mg/L MET；3)移栽：将步骤2)获得的完整植株从生根炼苗同步化培养基中取出，洗净根部残留培养基，移栽至育苗床或育苗大棚；步骤1)中的外植体的获取方法如下：取三叶青藤带腋芽的茎段消毒后接种于繁殖培养基上培养获得不定芽，并在无菌条件下切割得到1.0‑2.0cm长的带芽茎段作为外植体，备用，所述繁殖培养基的配方为：MS+1.5mg/L BA+0.4mg/L LFS+0.5mg/L IBA；所述生根炼苗同步化培养基的配方为：1/2MS+0.2mg/L IBA+1.5mg/L NAA+1.0mg/L IAA+0.4mg/L MET；步骤2)中，所述生根炼苗同步化培养基还含有1.2mg/L纳米氧化锌。