[发明专利]一种快速检测地中海贫血常见突变基因的试剂盒

摘要

本发明公开了一种快速检测地中海贫血常见突变基因的试剂盒，其包括针对‑‑SEA、‑‑THAI、‑α2.4、‑α21.9、HPFH‑SEA、DBT、‑α4.2、‑α3.7、αCSα、αQSα、αWestmeadα、Hb Q‑Thailand、β‑90、β‑29、β‑28、βCap+40‑43、βInt M、βInt CD、βCD14‑15、βCD17、βCD26、β27/28、βIVS‑I‑1、βIVS‑I‑5、βCD37、βCD41‑42、βCD43、βCD71–72、βCD95、βIVS‑II‑654设计的引物及检测性别的引物，这些引物分2管分装。该试剂盒可快速、准确的检测常见地贫突变基因。

主权项

一种快速检测地中海贫血常见突变基因的试剂盒，其特征在于：包括针对缺失型地贫基因‑‑SEA、‑‑THAI、‑α2.4、‑α21.9、HPFH‑SEA和Gγ+(Aγδβ)0设计的引物，针对缺失型地贫基因‑α4.2和‑α3.7采用Y1区段和Y2区段相对定量分析设计的引物，针对非缺失型地贫等位基因αCSα、αQSα、αWestmeadα、Q‑Thailand、β‑90、β‑29、β‑28、βCap+40‑43、βIntM、βIntCD、βCD14‑15、βCD17、βCD26、β27/28、βIVS‑I‑1、βIVS‑I‑5、βCD37、βCD41‑42、βCD43、βCD71–72、βCD95、βIVS‑II‑654设计的引物，针对非缺失型地贫等位基因αCSα、αQSα、αWestmeadα、β‑28、βCD17、βCD26、β27/28、βIVS‑I‑1、βCD41‑42、βCD43、βCD71–72、βIVS‑II‑654设计的正常对照引物，以及检测性别的AMXY引物，这些引物分2个检测管分装，2个检测管分别记为tube1和tube2，其中：tube1检测管包含的引物名称及序列如下：Beta1‑FAM‑F：5’‑6FAM‑TCCTAAGCCAGTGCCAGAAGAGC‑3’；Beta2‑FAM‑R：5’‑6FAM‑CCTGAGACTTCCACACTGATGC‑3’；Beta3‑FAM‑R：5’‑6FAM‑AGTTGGACTTAGGGAACAAAGGAAC‑3’；CQW‑co‑ROX‑R：5’‑ROX‑ACCTCCATTGTTGGCACATTCC‑3’；AMXY‑6FAM‑F：5’‑6‑FAM‑CCCTGGGCTCTGTAAAGAATAGTG‑3’；AMXY–R：5’‑ATCAGAGCTTAAACTGGGAAGCTG‑3’；CD37M‑R：5’‑GGACTCAAAGAACCTCTGGGACT‑3’；IntM‑R：5’‑AAAAAAACAAAAATCCTCAGGAGTCAGTTGCACT‑3’；‑90M‑R：5’‑GTAGATTGGCCAACCCAAGGGTA‑3’；‑28M‑R：5’‑CAAAACAATAGATGGCTCTGCCCTGACTAC‑3’；‑29M‑R：5’‑GATGGCTCTGCCCTGCCTTTC‑3’；IntCD‑R：5’‑CCTCAGGAGTCAGATGCATCC‑3’；CD17M‑R：5’‑AAAAACAACTTCATCCACGTTCGCCTA‑3’；Cap+40‑43M‑R：5’‑AAAAGATGCACCATGGTGTCTGAGG‑3’；CD14‑15(+G)M‑R：5’‑CCACGTTCACCTTGCTCTACCA‑3’；CD26M‑R：5’‑ACCAACCTGCACAGGGTCTT‑3’；IVS‑Ⅰ‑1M‑R：5’‑CTGTCTTGTAACCTTGATGCCAAA‑3’；IVS‑Ⅰ‑5M‑R：5’‑AACTTAAACCTGTCTTGTAACCTTGACAG‑3’；CD27/28(+C)M‑R：5’‑TTTTGATACCAACCTGACCAGGAGC‑3’；CD71‑72(+A)M‑F：5’‑CAAGAAAGTGCTCGGTGCCTGTAA‑3’；CD95M‑F：5’‑GTGAGCTGCACTGTGACGAAG‑3’；CD43M‑F：5’‑CCTTGGACCCAGAGGTTCGTTT‑3’；CD41‑42M‑F：5’‑CAAAAAAAAAACAAAACTACCCTTGGACCCAGATGTTG‑3’；654M‑F：5’‑CAGTGATAATTTCTGGGTTGAGGT‑3’；WS‑N‑F：5’‑AGTTCACCTCTGCGGTGCAC‑3’；CS‑N‑F：5’‑CGTGCTGACCTCCAAATACTGTT‑3’；QS‑N‑F：5’‑CTGCGGTGCAAGCCTACCT‑3’；Y1‑Y2‑HEX‑F：5’‑HEX‑CAGGGATGCACCCACTGGCA‑3’；Y1‑Y2‑R：5’‑CTCGACACGCATCTGCTCAGGGGTGAGGAAGGAAGGGGTG‑3’；Tube2检测管包含的引物名称及序列如下：Beta1‑TAMRA‑F：5’‑TAMRA‑TCCTAAGCCAGTGCCAGAAGAGC‑3’；Beta2‑TAMRA‑R：5’‑TAMRA‑CCTGAGACTTCCACACTGATGC‑3’；Beta3‑TAMRA‑R：5’‑TAMRA‑AGTTGGACTTAGGGAACAAAGGAAC‑3’；CQW‑co‑HEX‑R：5’‑HEX‑ACCTCCATTGTTGGCACATTCC‑3’；‑28N‑R：5’‑TAGATGGCTCTGCCCTGACATT‑3’；CD17N‑R：5’‑CAACTTCATCCACGTTCACCAT‑3’；CD26N‑R：5’‑ACCAACCTGCTCAGGGACTC‑3’；IVS‑Ⅰ‑1N‑R：5’‑CTGTCTTGTAACCTTGATACCATC‑3’；CD27/28N‑R：5’‑AAAATGATACCAACCTGCCCAGCGC‑3’；CD71‑72N‑F：5’‑CAAGAAAGTGCTCGGTGCCTTGAG‑3’；43/41‑42N‑F：5’‑CCTTGGACCCAGAGGTTCCTTG‑3’；654N‑F：5’‑CAAAAAACAAAAAAAAAAAACAGTGATAAGTTCTGGGTTAAGGC‑3’；WS‑M‑F：5’‑GAGTTCACCCCTGCGGTTCAG‑3’；CS‑M‑F：5’‑CGTGCTGACCTCCAAATACAGTC‑3’；QS‑M‑F：5’‑CTGCGGTGCACGGCTCACC‑3’；A1‑74M‑HEX‑F：5’‑HEX‑AACGCCGTGGCGCACTTGC‑3’；A1‑QT‑R：5’‑CAAAACAGCAGGCAGTGGCTTAGGAG‑3’；THAI‑HEX‑R：5’‑HEX‑CTTGGATCTGCACCTCTGGGTAGG‑3’；THAI‑F：5’‑GAATAAAGCGAGAGGAATCACATTCCTC‑3’；SEA‑HEX‑F：5’‑HEX‑AGAAGCTGAGTGATGGGTCCG‑3’；SEA‑R：5’‑TGGACTTAAGTGATCCTCCTGCCC‑3’；HPFH‑F：5’‑AAAACCAGCCTCATGGTAGCAGAATC‑3’；HPFH‑M‑FAM‑R：5’‑6FAM‑TGGTATCTGCAGCAGTTGCC‑3’；DBT‑M‑FAM‑F：5’‑6FAM‑CCAGAAATTGCCTCATGTCTCT‑3’；DBT‑R：5’‑CACATATAAAATGCTGCTAATGCTTCATTAC‑3’；2.4‑HEX‑F：5’‑HEX‑ACCACGACCTCTAGGCCAGT‑3’；2.4R：5’‑CAACCAGCCCTCTGCTGTAC‑3’；21.9‑F：5’‑GGAGCTTTTCCTTCCCTGGAACG‑3’；21.9‑HEX‑R：5’‑HEX‑TGTGGTTGGAGAATGGAGGTGG‑3’；上述引物中，“M”代表突变位点，“N”代表正常对照位点，FAM是指羟基荧光素，ROX是指羧基‑X‑罗丹明，HEX是指六氯‑6‑甲基荧光素，TAMRA是指羧基四甲基罗丹明。