[发明专利]一种高效率农杆菌介导大豆根毛转化方法有效
| 申请号： | 201710692347.0 | 申请日： | 2017-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN109385446B | 公开（公告）日： | 2022-01-04 |
| 发明（设计）人： | 邢邯;黄颜众;轩慧冬;郭娜;黄鹭;王海棠 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 徐冬涛;杜静 |
| 地址： | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开一种高效率农杆菌介导大豆根毛转化方法，包括如下步骤：1)获得携带目的基因的发根农杆菌菌苔，利用液体共培养培养基悬浮菌苔，调节OD600值在0.6～1.0；2)将在萌发培养基中萌发的大豆种子沿种脐剖开获得半种子，将半种子放入步骤1)制备的含有悬浮菌苔的液体共培养培养基中，侵染15～30min；3)步骤2)侵染后的半种子布于空培养容器中，23～25℃黑暗共培养3～5天；4)步骤3)共培养后的半种子切去根部，布于培养基中，23～25℃黑暗培养，长出根后，选取长度为4～6cm的阳性根切下单独培养。本发明所述方法操作时间短，简单高效，发根率高，阳性率高；且外植体不容易被农杆菌和其他杂菌污染。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 高效率 杆菌 大豆 根毛 转化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种高效率农杆菌介导大豆根毛转化方法，其特征在于，具体包括如下步骤：1)获得携带目的基因的发根农杆菌菌苔，利用液体共培养培养基悬浮菌苔，调节OD600值在0.6～1.0；2)将在萌发培养基中萌发的大豆种子沿种脐剖开获得半种子，将半种子放入步骤1)制备的含有悬浮菌苔的液体共培养培养基中，侵染15～30min；3)步骤2)侵染后的半种子布于空培养容器中，23～25℃黑暗共培养3～5天；4)步骤3)共培养后的半种子切去根部，布于培养基中，23～25℃黑暗培养，长出根后，选取长度为4～6cm的阳性根切下单独培养。
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