[发明专利]一种大鼠肾小球系膜细胞分离及培养方法在审
申请号: | 201710711746.7 | 申请日: | 2017-08-18 |
公开(公告)号: | CN109402042A | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 不公告发明人 | 申请(专利权)人: | 江苏齐氏生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 214434 江苏省无锡市江阴市东*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供一种大鼠肾小球系膜细胞分离及培养方法,包括步骤:(a)含双抗预冷PBS灌洗肾脏;(b)分离肾皮质,剪碎并于重叠筛网上进行研磨,收集筛网上的组织块,清洗数次;(c)混合酶消化,筛网过滤,收集滤液离心;(d)完全培养基重悬细胞沉淀,接种于处理后的培养瓶中;(e)培养数天后更换混合完全培养基继续培养;(f)细胞免疫荧光鉴定分离的肾小球系膜细胞。本发明提供了一种操作简单、高效获得活性高的大鼠肾小球系膜细胞的方法。 | ||
搜索关键词: | 肾小球系膜细胞 大鼠 完全培养基 细胞免疫荧光 筛网过滤 细胞沉淀 研磨 混合酶 活性高 培养瓶 肾皮质 组织块 灌洗 剪碎 筛网 双抗 预冷 重悬 肾脏 接种 清洗 消化 | ||
【主权项】:
1.一种大鼠肾小球系膜细胞分离及培养方法,包括步骤:(a)含双抗预冷PBS灌洗肾脏;(b)分离肾皮质,剪碎并于重叠筛网上进行研磨,收集筛网上的组织块,清洗数次;(c)混合酶消化,筛网过滤,收集滤液离心;(d)完全培养基重悬细胞沉淀,接种于多聚赖氨酸包被的培养瓶中;(e)培养数天后更换混合完全培养基继续培养;(f)细胞免疫荧光鉴定分离的肾小球系膜细胞。
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