[发明专利]功能化氧化石墨烯高效运载CRISPR/Cas9用于基因编辑的方法有效

专利信息
申请号: 201710719879.9 申请日: 2017-08-21
公开(公告)号: CN107384894B 公开(公告)日: 2019-10-22
发明(设计)人: 周小明;邢达;乐花花 申请(专利权)人: 华南师范大学
主分类号: C12N9/22 分类号: C12N9/22;C12N15/113;C12N15/90
代理公司: 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 代理人: 崔红丽;裘晖
地址: 510631 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开一种功能化氧化石墨烯高效运载CRISPR/Cas9用于基因编辑的方法。本发明的NGO‑PEG‑PEI/Cas9/sgRNA复合体是将氨基化PEG和PEI共价修饰到氧化石墨烯上,得到NGO‑PEG‑PEI;然后将Cas9蛋白和sgRNA在室温条件下组装成Cas9/sgRNA复合体;将NGO‑PEG‑PEI与Cas9/sgRNA复合体在室温条件下进行混合得到。将该复合体与靶基因进行混合,实现靶基因的编辑。本发明中功能化GO具有生物相容性好,负载效率高的的特点,能够高效运载Cas9/sgRNA复合体进细胞来执行其功能;且具有保护Cas9/sgRNA复合体免于酶降解的功能,稳定性高。
搜索关键词: 复合体 功能化氧化石墨 运载 室温条件 靶基因 生物相容性 氧化石墨烯 负载效率 共价修饰 氨基化 功能化 酶降解 基因 蛋白 组装 细胞
【主权项】:
1.一种NGO‑PEG‑PEI/Cas9/sgRNA复合体,其特征在于:该复合体是将PEI和氨基化PEG共价修饰到氧化石墨烯上,得到功能化氧化石墨烯NGO‑PEG‑PEI;然后将Cas9蛋白和sgRNA在室温条件下组装成Cas9/sgRNA复合体;将NGO‑PEG‑PEI与Cas9/sgRNA复合体在室温条件下进行混合,得到NGO‑PEG‑PEI/Cas9/sgRNA复合体;所述的PEI为聚乙烯亚胺。
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