[发明专利]一种苦荞麦活性肽及其应用

摘要

本发明一种苦荞麦活性肽的制备方法，将苦荞种子经干燥、粉碎、脱脂得到苦荞粉；以苦荞粉为原料，用硫酸铵盐析法提取苦荞水溶性蛋白，得到苦荞蛋白提取物；将苦荞蛋白提取物经胃蛋白酶和胰蛋白酶依次酶解制备得到多肽酶解片段；将多肽酶解片段经过凝胶过滤进行分离纯化，紫外检测仪280nm检测，并收集分离峰，即可得到苦荞麦活性肽。本发明通过上述的方法获得了两种新的苦荞麦活性肽。本发明还提供了上述的两种苦荞麦活性肽作为饲料添加剂的应用。本发明的生物活性肽不仅能调节仔猪肠道菌群平衡、降低仔猪腹泻率和死亡率，还能促进仔猪生长、提高饲料转化利用率，同时降低血液胆固醇甘油三酯，改善仔猪血液生化指标，提高免疫力和抗病能力。

主权项

一种苦荞麦活性肽，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，其制备方法包括如下步骤：一个制备苦荞蛋白提取物的步骤，苦荞籽粒经干燥后粉碎制备得苦荞粉，采用石油醚脱脂，将脱脂后的苦荞粉采用pH7.0磷酸盐缓冲液室温下搅拌提取1～4小时，然后1～6℃离心分离收集上清液，其中离心转速为3000～7000r/min，离心时间为20～60min；向上清液中加入硫酸铵使饱和度达到80％以上，搅拌0.5～2小时，1～6℃离心，离心转速为3000～7000r/min，离心时间为20～40min，收集沉淀得苦荞蛋白提取物；其中所述的磷酸盐缓冲液的浓度为0.02M,pH为7.4；一个酶解苦荞蛋白提取物的步骤，将苦荞蛋白提取物复溶得苦荞蛋白水溶液，向苦荞蛋白水溶液加入质量百分比浓度为3～5％的胃蛋白酶酶解液，调节pH至2.0，30～40℃水浴震荡酶解0.5～1.5小时；然后加入质量百分比浓度为3～5％的胰蛋白酶酶解液，调节pH至7.5，30～40℃水浴继续酶解1～3小时，接着将水解液加热至,90～98℃煮3～6分钟终止酶解，冻干保存；一个制备苦荞麦活性肽的步骤，将苦荞蛋白酶解产物的冻干粉溶解后经凝胶色谱层析，用磷酸盐缓冲液以0.5～1.2mL/min流速进行洗脱，每18～22分钟收集一管，紫外检测仪280nm检测吸光值，收集主要分离峰，过夜透析，冻干保存，即可得到苦荞麦活性肽。