[发明专利]一种人工诱导多能干细胞分化为神经细胞的方法在审
申请号: | 201710728774.X | 申请日: | 2017-08-23 |
公开(公告)号: | CN107287160A | 公开(公告)日: | 2017-10-24 |
发明(设计)人: | 张正亮 | 申请(专利权)人: | 安徽惠恩生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079 |
代理公司: | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙)11504 | 代理人: | 毛雨田 |
地址: | 230000 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种人工诱导多能干细胞分化为神经细胞的方法,该方法具体步骤如下取人体胚胎干细胞接种在BG02培养基上;培养过程中每天更换培养液,细胞培养至汇合状态后,消化传代后接种至新的饲养层细胞上;将胚胎干细胞接种至加入不含LIF的ES常规培养基中,培养36‑48h得到类胚体;将类胚体分散成单个细胞后接种至加入10%FBS的DMEM高糖培养基中;胰酶消化类胚体,之后接种至DMEM/F12培养基中得到神经干细胞。本发明公开了一种多能干细胞体外诱导分化为神经细胞的方法,胚胎干细胞因其体外无限扩增能力、全能性和较低的免疫性而作为理想的种子细胞,本发明提供的方法操作简单,易于体外扩增,取材方便,提供了一种经济安全,行之有效的新的神经细胞来源。 | ||
搜索关键词: | 一种 人工 诱导 多能 干细胞 化为 神经细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种人工诱导多能干细胞分化为神经细胞的方法,其特征在于,该方法具体步骤如下:S1、取人体胚胎干细胞接种在BG02培养基上;S2、培养过程中每天更换培养液,细胞培养至汇合状态后,消化传代后接种至新的饲养层细胞上,传代比例1:5‑6;S3、将S2中得到的胚胎干细胞接种至加入不含LIF的ES常规培养基中,培养36‑48h得到类胚体;S4、将S3中得到的类胚体分散成单个细胞后接种至加入10%FBS的DMEM高糖培养基中,培养6‑8d;S5、胰酶消化S4中预培养的类胚体,之后接种至DMEM/F12培养基中,培养5‑6d得到神经干细胞。
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