[发明专利]一种水蛭粗提物的冻干保存工艺

摘要

本发明涉及一种水蛭粗提物的冻干保护剂及冻干保存工艺，属水蛭粗提物保护和存储技术领域。其特点是：水蛭粗提物的冻干保护剂由一定质量百分比的海藻糖、PEG2000和甘露醇组成；以水蛭粗提物为基础物质，在500ml水蛭粗提物溶液中，按照海藻糖、PEG2000和甘露醇各自的质量百分比依次、逐步将它们加入，通过本发明的八个步骤方法，大大提高水蛭粗提物冻干品生物活性的稳定性，冻干保护剂制作简单，冻干保护工艺操作方便，保护效果好，水蛭粗提物冻干粉的活性在4℃冰箱内保存一年后，活性损失率由原来的45%左右降低至15%以下。解决了现有水蛭粗提物经过冻干处理后其活性损失率高，活性保存不稳定的问题。

主权项

1.一种水蛭粗提物的冻干保存工艺，其特征在于，它是通过如下的工艺步骤实现的：/n1）、首先对冻干操作室进行消毒、灭菌处理，保证达到无菌标准；/n2）、在无菌冻干操作室内，将-18℃冷冻的新鲜水蛭分别称重，匀浆；再分别用水蛭体重4倍的生理盐水稀释匀浆液，室温23±2℃下不断搅拌20min，搅拌后用10 % 的三氯乙酸溶液调整pH至2.5，65℃水浴15min，其间适当搅拌；水浴后4℃10000r/min离心10 min，收集上清液，上清液用1mol/L的NaOH溶液调整pH 至7.0，而后4℃10000r/min离心10 min，收集上清液即为菲牛蛭粗提物；/n3）、将提取的水蛭粗提物上清液分装到1000ml的烧杯中，每个1000ml的烧杯中加入500ml水蛭粗提物上清液；/n4）、在分装有500ml水蛭粗提物上清液的烧杯中加入：0.5～5.5%海藻糖、0.5～4.5%PEG2000和1～5%甘露醇，并用玻璃棒搅拌20～40min，使其溶解；/n5）、将溶解后的水蛭粗提物溶解液分装到经过预先灭菌处理好的10ml西林瓶中，每个西林瓶中灌入5ml水蛭粗提物溶解液；/n6）、将每个装有5ml水蛭粗提物溶解液的西林瓶放入冷冻干燥机的干燥箱中进行预冻，预冻温度设置为-45℃，预冻时间设置为6h；/n7）、将经过预冻后的水蛭粗提物溶解液进行第一步冷凝干燥和第二步解析干燥；第一步冷凝干燥时：将冷冻干燥箱的前箱隔板温度设置为-30℃，后箱冷阱温度设置为-75℃，时间设置为22h，压力设置为20Pa；第二步解析干燥时：将冷冻干燥箱的前箱隔板温度设置为25℃，后箱冷阱温度设置为-75℃，时间设置为19h，压力设置为10Pa；/n8）、冷凝干燥和解析干燥结束后，测试压力小于3Pa，对每个西林瓶进行压盖，制成成品。/n